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从自噬角度研究增龄过程中睾丸Sertoli细胞损伤机制及淫羊藿苷的干预作用

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英文缩略词表

引言

材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物或细胞株

1.1.2 实验药物

1.1.3 实验主要试剂

1.1.4 实验主要抗体

1.1.5 实验主要仪器

1.2 实验方法

1.2.1 主要溶液配制

1.2.2 实验分组与处理

1.2.3 大鼠睾丸重、附睾重及其指数的测定

1.2.4 大鼠附睾精子密度和活率的测定

1.2.5 ELISA 法检测大鼠睾丸组织中睾酮水平的变化

1.2.6 HE 染色法检测大鼠睾丸组织形态变化

1.2.7 免疫荧光法检测大鼠睾丸组织中Sertoli 细胞数量的变化

1.2.8 免疫荧光双标法检测睾丸组织中自噬相关蛋白ATG5 和LC3 的表达和定位结果

1.2.9 透射电镜法观察大鼠睾丸Sertoli 细胞中自噬相关超微结构的变化

1.2.10 Western blot 法检测大鼠睾丸组织中Sertoli 细胞分泌的相关细胞因子GDNF、PLZF、SCF 和BMP4 蛋白的表达水平的变化

1.2.11 TM4 细胞的培养

1.2.12 光镜下观察TM4 细胞形态学变化

1.2.13 采用Hoechst33342 荧光染色法检测TM4 细胞凋亡

1.2.14 Western blot 法检测TM4 细胞中自噬相关蛋白LC3 和P62 蛋白的表达水平的变化

1.2.15 透射电镜法观察TM4 细胞超微结构变化

1.2.16 统计学处理

结果

第一部分:增龄对大鼠睾丸Sertoli细胞损伤和自噬水平的影响

1.1 增龄对大鼠睾丸组织形态学的影响

1.2 增龄对大鼠睾丸Sertoli 细胞数量的影响

1.3 增龄对大鼠睾丸Sertoli细胞ATG5蛋白表达的影响

1.4 增龄对大鼠睾丸Sertoli细胞LC3蛋白表达的影响

1.5 增龄过程中大鼠睾丸Sertoli 细胞自噬相关超微结构变化

第二部分 淫羊藿苷对自然衰老大鼠睾丸Sertoli细胞损伤和自噬水平的调节作用

2.1 淫羊藿苷对自然衰老大鼠睾丸重、睾丸指数、附睾重和附睾指数的影响

2.2 淫羊藿苷对自然衰老大鼠附睾精子密度和活率的影响

2.3 淫羊藿苷对自然衰老大鼠睾丸组织中睾酮(T)水平的影响

2.4 淫羊藿苷对自然衰老大鼠睾丸组织形态的影响

2.5 淫羊藿苷对自然衰老大鼠睾丸Sertoli细胞数量的影响

2.6 淫羊藿苷对自然衰老大鼠睾丸Sertoli细胞相关分泌因子蛋白表达水平的影响

2.7 淫羊藿苷对自然衰老大鼠睾丸Sertoli细胞ATG5蛋白表达的影响

2.8 淫羊藿苷对自然衰老大鼠睾丸Sertoli细胞LC3蛋白表达的影响

2.9 淫羊藿苷对自然衰老大鼠睾丸Sertoli细胞自噬相关超微结构的影响

第三部分 淫羊藿苷对小鼠睾丸Sertoli细胞株TM4细胞损伤的调节作用及机制

3.1 不同浓度CQ对TM4细胞形态的影响

3.2 不同浓度CQ对TM4细胞凋亡的影响

3.3 不同浓度CQ对TM4细胞自噬相关蛋白LC3和P62表达水平的影响

3.4 不同浓度CQ对TM4细胞自噬相关超微结构的影响

3.5 淫羊藿苷对TM4细胞形态的影响

3.6 淫羊藿苷对TM4细胞凋亡的影响

3.7 淫羊藿苷对TM4细胞自噬相关蛋白LC3和P62表达水平的影响

3.8 淫羊藿苷对TM4细胞中自噬相关超微结构的影响

讨论

结论

参考文献

综述:睾丸支持细胞常见标记物及其应用

致谢

附录:攻读硕士学位期间发表的部分学术论著

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著录项

  • 作者

    尤旭;

  • 作者单位

    三峡大学;

  • 授予单位 三峡大学;
  • 学科 药学
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 赵海霞,张长城;
  • 年度 2020
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类
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