细胞免疫治疗对肝癌患者CXCR1、CXCR2、CXCL8表达的影响

摘要

目的:探讨细胞免疫治疗对肝癌患者外周血及局部病灶组织CXCR1、CXCR2、CXCL8表达的影响。
　　方法:筛选典型的肝细胞肝癌患者35例，根据肝脏部位电子计算机断层扫描(computerized tomographic scanning，CT)特征以及2010年美国癌症联合会公布的肝癌的TNM分期标准将其分为T2期24例，T3期11例;酶联免疫吸附法分别测定患者血清中CXCL8、GP-73含量;以中性粒细胞分离液密度梯度分离纯化外周血中性粒细胞，在PBNs中提取总RNA，后逆转录成cDNA并配制PCR体系进行扩增，凝胶电泳检测肝癌患者体外周血及局部病灶组织CXCR1、CXCR2、CXCL8 mRNA含量，以lgcDNA/lgGAPDH比值代表其最终mRNA水平。选取8例接受CIK细胞治疗患者，进一步观察T2、T3期患者CXCR1/2、CXCL8mRNA含量变化。
　　结果:肝癌患者血清内CXCL8、GP-73含量分别是(315.66±100.85)pg/mL、(214.84±49.11) ng/mL，与正常对照组相比均有显著性差异(P＜0.0001);外周血PBNs内CXCR1 mRNA、CXCR2 mRNA、CXCL8mRNA分别为(1.1333±0.0551)lgcDNA/lgGAPDH、(0.8863±0.0605)lgcDNA/lgGAPDH、(1.2007±0.073)lgcDNA/lgGAPDH，与正常对照组相比均有显著性差异(P＜0.0001);CIK细胞免疫治疗后患者外周血PBNs内CXCR1mRNA、CXCR2mRNA、CXCL8mRNA分别为(0.87±0.0563lgcDNA/lgGAPDH、(0.76±0.0428) lgcDNA/lgGAPDH、(1.095±0.064) lgcDNA/lgGAPDH，与正常对照组相比均有显著性差异(P＜0.0001);
　　肝癌活检组织苏木精-伊红染色法结果显示:肝癌细胞体积明显扩大，核形状多变且不规则，核分裂增多，细胞互相重叠，分辨不清，瘤组织内可见丰富的新生微血管;PCR检测14例手术切除组织CXCR1/2、CXCL8mRNA含量与正常对照相比，差异均具有统计学意义(t=6.528，P＜0.0001; t=9.583，P＜0.0001; t=7.832,P＜0.0001)。 T2期肝癌患者的CXCR1/2、CXCL8 mRNA含量分别是(0.4462±0.0984)、(1.0509±0.1262)、(0.9032±0.1095) lgGAPDH/lgcDNA，T3期肝癌患者的CXCR1/2、CXCL8 mRNA含量分别是(0.8296±0.1628)、(1.1361±0.1888)、(1.2649±0.2357) lgGAPDH/lgcDNA，统计学分析显示T2、T3期肝癌患者CXCR1和CXCL8 mRNA表达差异有显著性（t=4.341，P=0.0010;t=2.893，P=0.0135），T2、T3期肝癌患者CXCR2表达差异未见差异性(t=0.8215，P=0.4274）。部分切除肝癌组织HE染色见较多含淡染的红细胞的管腔，提示病灶组织产生新生的血管。
　　结论:
　　(1)肝癌患者血清CXCL8、GP-73含量升高，且PBNs内CXCL8和CXCR1/2mRNA水平增加，提示血清中高表达的CXCL8与PBNs内CXCL8 mRNA转录翻译有关。
　　(2)细胞免疫治疗可下调PBNs内CXCL8、CXCR1/2的过度表达，降低过度分泌CXCL8所致的炎症反应。
　　(3)肝癌患者局部病灶组织CXCR1、CXCR2、CXCL8表达增加，提示PBNs参与局部病灶炎症应答，促进肿瘤细胞侵袭转移。
　　(4)抑制CXCR1、CXCR2过度表达，不仅可降低局部炎症反应，还能抑制肿瘤细胞向周边组织侵袭，似可作为抗肝癌细胞生长的新型分子靶位。

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引言

第一部分：CIK细胞抗肿瘤的临床应用进展

1 CIK细胞的抗肿瘤作用

2 CIK细胞对肿瘤患者细胞免疫功能的影响

3 CIK细胞治疗与肿瘤患者的生存期和生存质量

第二部分：肝癌患者外周血CXCR1、CXCR2、CXCL8表达

2．1 引言

2．2 材料与方法

2．3 结果

2．4 讨论

第三部分：肝癌患者肝活检组织CXCR1、CXCR2、CXCL8表达

3．2 材料与方法

3．3 结果

3．4 讨论

结论

参考文献

致谢

作者简介及读研期间主要科研成果