缩略语中英文对照
第一章 前言
1.1 鱼类体色研究进展
1.2 B类Ⅰ型清道夫受体
1.2.1 简介
1.2.2 研究现状
1.3 鱼类体色相关miRNAs 的研究
1.3.1 miRNAs 简介
1.3.2 miRNAs 在鱼类中的研究进展
第二章 锦鲤scarb1 基因的克隆及表达分析
2.1 实验材料
2.1.1 实验锦鲤
2.1.2 实验设计
2.1.3 实验仪器
2.1.4 实验试剂
2.2 实验方法
2.2.1 具体引物设计过程
2.2.2 皮肤总RNA提取过程
2.2.3 锦鲤第一链cDNA的合成及中间序列的扩增
2.2.4 锦鲤scarb1基因的5' RACE和3' RACE
2.2.5 PCR产物的胶回收
2.2.6 胶回收产物与pMD-19T载体连接
2.2.7 转化和菌液PCR验证
2.2.8 基因序列拼接及生物信息学分析
2.2.9 scarb1基因在各发育阶段及各组织中的表达
2.3 实验结果
2.3.1 红锦鲤红皮总RNA验证
2.3.2 锦鲤scarb1基因中间片段的扩增
2.3.3 锦鲤scarb1基因5'端和3'端的扩增
2.3.4 锦鲤scarb1基因序列拼接及分析
2.3.5 锦鲤scarb1 基因的同源性和系统进化分析
2.3.6 锦鲤scarb1基因在发育阶段及组织的表达
2.4 讨论
第三章 锦鲤scarb1 基因的原核表达及多克隆抗体的制备
3.1 实验材料
3.1.1 实验载体
3.1.2 实验动物
3.1.3 实验仪器
3.1.4 实验试剂
3.2 实验方法
3.2.1 锦鲤组织取样及总RNA的提取
3.2.2 第一链cDNA的合成
3.2.3 构建scarb1重组质粒
3.2.4 原核表达
3.2.5 目的蛋白检测
3.2.6 目的蛋白的纯化
3.2.7 纯化蛋白的western blot检测
3.2.8 多克隆抗体的制备
3.2.9 免疫组化
3.3 实验结果
3.3.1 锦鲤scarb1基因抗原决定簇片段克隆
3.3.2 重组克隆质粒的双酶切检验
3.3.3 目的蛋白的诱导
3.3.4 免疫组化
3.4 讨论
第四章 scarb1在不同体色锦鲤皮肤和鳍条中的表达分析
4.1 实验材料
4.1.1 实验材料
4.1.2 实验仪器
4.1.3 实验试剂
4.2 实验方法
4.2.1 总RNA的提取
4.2.2 荧光定量第一链cDNA的合成
4.2.3 scarb1在不同体色锦鲤皮肤和鳍条中的表达
4.2.4 不同体色锦鲤皮肤和鳍条中总色素含量及类胡萝卜素含量测定
4.2.5 不同体色锦鲤皮肤和鳍条的western blot
4.3 实验结果
4.3.1 scarb1在不同体色锦鲤组织中的表达
4.3.2 不同体色锦鲤色素含量测定
4.3.3 不同体色锦鲤皮肤和鳍条的western blot
4.4 讨论
第五章 scarb1和miR-430 靶向关系及相关性分析
5.1 实验材料
5.1.1 实验样品
5.1.2 实验仪器
5.1.3 实验试剂
5.2 实验方法
5.2.1 pre-miR-430序列比对
5.2.2 组织取样及总RNA的提取
5.2.3 引物设计
5.2.4 第一链cDNA合成
5.2.5 miR-430在各发育阶段及各组织中的表达
5.2.6 scarb1目的基因片段合成
5.2.7 构建含有miR-430慢病毒载体
5.2.8 细胞转染与双荧光报告素酶检测
5.3 实验结果
5.3.1 pre-miR-430序列比对
5.3.2 miR-430在不同发育时期和组织中的表达
5.3.3 scarb1和miR-430的相关性分析
5.3.4 scarb1 3’-UTR与miR-430 的结合区域
5.3.5 转染后各组荧光素酶的活性
5.4 讨论
第六章 miR-430 对锦鲤体色的影响
6.1 实验材料
6.1.1 实验用鱼
6.1.2 实验设计
6.1.3 实验仪器
6.1.4实验试剂
6.2 实验方法
6.2.1 总RNA的提取
6.2.2 荧光定量第一链cDNA的合成
6.2.3 miR-430、sccrb1、spr和xdh在三组锦鲤组织中的表达
6.2.4 总色素含量及类胡萝卜素含量测定
6.2.5 三组锦鲤皮肤免疫组化
6.2.6 三组锦鲤皮肤和鳍条western blot
6.3 实验结果
6.3.1 miR-430、scarb1、spr和xdh在三组锦鲤组织中的表达
6.3.2 三组锦鲤组织中色素含量测定
6.3.3 三组锦鲤皮肤免疫组化
6.3.4 三组锦鲤皮肤和鳍条的western blot
6.4 讨论
参考文献
附 录
致 谢
攻读学位期间发表的学术论文目录
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河南师范大学;
