瑞舒伐他汀对兔腹主动脉粥样硬化药物涂层支架置入后再内皮化的影响

摘要

1.背景：　　支架术后尽快再内皮化对防止PCI术后的再狭窄有着重要作用，DES支架置入减少了再狭窄，但既抑制了中膜平滑肌的增殖和迁移，也延迟了支架内的再内皮化进程。血管支架置入后再内皮化包括内皮细胞的增值迁移，内皮祖细胞（EPCs）动员、迁移、归巢和分化等方式。支架临近原有宿主内皮细胞增值，向支架内迁移，逐渐覆盖支架是重要的内膜修复方式之一。新近研究表明他汀类药物除具有调脂作用外,还可以促进 EPCs动员、分化、增殖、迁移和归巢。　　2.目的：　　通过检测兔模型给予瑞舒伐他汀后第4周再内皮化相关活性物质SDF-1、VEGF、eNOS、MMP-9等的含量水平及EPCs、EC相关抗原RNA的表达及通过病理 HE染色观察支架内再内皮化的相关指标来研究瑞舒伐他汀对内皮祖细胞的影响，探讨瑞舒伐他汀对支架置入后再内皮化的影响　　3.对象与方法　　3.1.选择纯种新西兰大白兔16只，给予高脂喂养（1%胆固醇+5%猪油）1周后行球囊损伤，8周后行腹主动脉造影，根据实验方案选择腹主动脉有明显斑块的实验兔14只，行支架植入术，其中2只实验兔于支架植入72小时内死亡被剔除，最终12只支架植入兔，随机分为模型组和瑞舒伐他汀（可定）组，每组各6只，支架植入后，模型组给予生理盐水灌胃，可定组给予瑞舒伐他汀（1mg/kg/d）灌胃，4周后处死，测血清 MMP9、eNOS、VEGF，qPCR检测特异性 EPCs、EC细胞的抗原水平，处死前造影结合 OCT观察支架内内膜覆盖情况，取含支架血管段标本处理后4%多聚甲醛浸泡并做好标记，送复旦大学附属中山医院行硬塑料包埋后，用硬组织切片机，选取每段血管支架切2片，行 HE染色， Leica电脑微图像分析仪和NIKON显微镜加Scion Image图像分析系统测量支架血管切片的新生内膜厚度、面积　　4.结果　　4.1.ELISA法检测血甘油三酯 TG可定组与模型组（2.02±0.12比2.59±0.17，P<0.05），可定组明显降低；总胆固醇 TC可定组与模型组（20.51±1.61比24.92±1.69，P<0.05），可定组明显降低；低密度脂蛋白LDL可定组与模型组（9.17±0.74比11.73±1.42，P<0.05），可定组明显降低　　4.2.酶联免疫法检测 VEGF可定组与模型组（140.1500±48.8489比60.6567±15.3222，P<0.05），可定组明显升高；MMP9可定组与模型组相比（114.1667±32.1603比28.3350±16.1084，P<0.05）,可定组明显升高；eNOS可定组与模型组相比（0.3416±0.1401比0.0282±0.0131，P<0.05），可定组较模型组明显升高。　　4.3.RT-PCR法检测含支架血管段血管EPCs、EC细胞的抗原水平:CD34可定组与模型组相比较（1.6755±0.1049比1.0000±0.1189，P<0.05），可定组表达量明显增多；VWF可定组与模型组相比较（3.9379±0.6229比1.0000±0.0931，P<0.05），可定组表达量较模型组增多；VEGFR-2可定组与模型组相比较（8.4210±1.5791比1.0000±0.2004，P<0.05），可定组表达量明显增多。　　4.4.病理学检查， HE染色观察两组支架内情况：新生内膜厚度，可定组与模型组相比（900085±84830比395865±154191，P<0.05）,内膜明显增厚；新生内膜面积可定组与模型组相比（69.11±9.82比35.69±15.28，P<0.05），增生面积/官腔面积可定组与模型组相比（0.262742±0.045343比0.164520±0.054154，P<0.05）　　5.结论：　　5.1.瑞舒伐他汀可以提高兔药物涂层支架置入后局部的内皮化相关因子，提升内皮相关基因表达水平　　5.2.瑞舒伐他汀可以加快兔药物涂层支架置入后内膜的增生进而促进药物涂层支架内再内皮化水平

目录

声明

英文缩略词

前言

材料与方法

1.试验药品及材料

2实验方法

3.统计学方法

结果

1. 血生化学指标检查，观测兔造模前，造模后及他汀对兔血脂等的影响

2.ELISA检测内皮相关因子eNOS、MMP9、VEGF的浓度

3.RT-PCR检测内皮相关基因VEGFR-2、VWF、CD34表达水平

4.HE染色观察含支架血管，增生厚度、增生面积及增生面积/管壁面积

讨论

1.兔动脉粥样硬化模型的建立

2.内皮祖细胞与再内皮化

3.他汀类促进再内皮化及其机制

结论

致谢

参考文献

附录一

附录二 文献综述:支架置入后的再内皮化研究

附录 3 在校期间科研、学术情况和论文