积雪草对高糖刺激下大鼠肾小管上皮细胞CTGF和FN表达影响的实验研究

摘要

目的:观察积雪草含药血清对高糖刺激下大鼠近端肾小管上皮细胞株NRK52E表达结缔组织生长因子(CTGF)及纤维连接蛋白(FN)的影响，进一步探讨积雪草抑制肾小管间质纤维化，防治糖尿病肾病的作用机制。　　方法:体外培养大鼠近端肾小管上皮细胞（NRK52E），随机分为6组：①正常对照组；②高糖刺激组；③高糖+积雪草高剂量组；④高糖+积雪草中剂量组；⑤高糖+积雪草低剂量组；⑥高糖+贝那普利组。培养48h后，收集细胞，进行后续试验：①Western Blot技术检测各组细胞CTGF、FN蛋白表达；②Real time PCR技术检测各组细胞CTGF、FN mRNA表达。　　结果:①与正常对照组相比，高糖刺激组CTGF和FN蛋白表达明显升高(P＜0.05)；与高糖刺激组比较，积雪草不同剂量组及贝那普利组CTGF和FN蛋白表达均明显下调（P＜0.05）；用药组之间比较，CTGF表达水平依次为积雪草中剂量组＜积雪草高剂量组＜贝那普利组＜积雪草低剂量组，FN表达水平依次为贝那普利组＜积雪草高剂量组＜积雪草中剂量组＜积雪草低剂量组；②与正常对照组相比，高糖刺激组CTGF和FN mRNA表达明显升高（2-△△Ct＞2）；与高糖刺激组比较，积雪草不同剂量组及贝那普利组CTGF和FN mRNA表达显著降低（2-△△Ct＜0.5）；用药组两两比较显示，CTGFmRNA表达组间有差异但均不明显，FN mRNA表达贝那普利组明显低于积雪草中剂量组（2-△△Ct＜0.5）。　　结论:①积雪草对高糖诱导的体外培养的肾小管上皮细胞CTGF、FN蛋白及mRNA的高表达有抑制作用；②积雪草抑制间质纤维化、防治糖尿病肾病的机制可能与抑制CTGF、FN的高表达，调节细胞外基质的过度分泌和沉积密切相关。

目录

声明

缩略词表

前言

材料与方法

1 实验材料

2 实验方法

结果

1积雪草颗粒对高糖诱导的NRK52E 细胞CTGF表达的影响

2积雪草颗粒对高糖诱导的NRK52E 细胞FN表达的影响

讨论

1 TGF-β1-CTGF-FN通路在RIF发生过程中的作用

2 糖尿病肾病及高糖刺激对CTGF和FN表达的影响

3.积雪草的现代药理研究

4.积雪草颗粒对高糖诱导的体外培养的肾小管上皮细胞CTGF、FN表达的影响

结论

致谢

参考文献

附录1 附图

附录2 文献综述:肾间质纤维化研究进展

附录3 硕士研究生期间获得科研成果