上皮性卵巢癌病人血清和肿瘤组织中KLK6、KLK8的表达及临床意义

摘要

目的：卵巢癌是妇科死亡率最高的恶性肿瘤，其发病隐匿，进展迅速，70％～80％的卵巢癌病人发现时已为晚期，其5年生存率仅为20％～30％，主要原因是早期卵巢癌没有症状，病人难以早期就诊，因此上皮性卵巢癌的早期诊断成为丞待解决的课题。本研究通过检测激肽释放酶基因6(Kallikrein Gene 6，KLK6)、激肽释放酶基因8(KallikreinGene 8，KLK8)在上皮性良性卵巢肿瘤、交界性卵巢肿瘤及卵巢癌组织中及血清中的表达水平，探讨KLK6、KLK8在卵巢癌发生和侵袭中的作用，以及作为肿瘤标记物，与CA125比较，用于卵巢癌早期诊断及术后随访的价值，为卵巢癌的药物治疗提供科学的实验依据。 方法：1 免疫组织化法检测上皮性卵巢肿瘤组织中KLK6、KLK8蛋白的表达水平，其中良性卵巢肿瘤20例、交界性卵巢肿瘤11例、卵巢癌62例(浆液性囊腺癌33例，粘液性囊腺癌18例，子宫内膜样腺癌11例)并用计算机病理图像分析系统测量其灰度值(A值)，计算平均值进行半定量分析。 2、比较上皮性良性卵巢肿瘤、交界性卵巢肿瘤及卵巢癌KLK6、KLK8阳性表达情况，以及KLK6及KLK8在卵巢癌组织中的阳性表达率与不同临床病理特征的关系。 3、酶联免疫吸附(Enzyme-linked Immunosorbent Assay，ELISA)双抗体夹心法检测血清激肽释放酶6(Human Kallikrein 6，hK6)、激肽释放酶8(Human Kallikrein 8，hK8)浓度，各组血清CA125浓度均由本院实验室采用电化学发光法常规测得。 4、比较上皮性良性卵巢肿瘤、交界性卵巢肿瘤及卵巢癌病人血hK6、hK8、CA125水平。分析卵巢癌组织中KLK6、KLK8表达的A值与血清浓度值之间的相关性。 5、根据文献给定的阳性标准，比较血清hK6、hK8、CA125检测用于卵巢癌诊断的敏感度及特异度。 6、应用SPSS12.0统计软件进行统计学分析，所有计量资料数据均以均数士标准差(-x±s)表示，均数的比较采用单因素方差分析，组间均数两两比较采用LSD-t检验。计数资料采用x 2检验，不同组织学类型、临床分期及病理分级表达阳性率的比较采用x 2检验和Fisher精确概率法，卵巢癌组织中A值与血清浓度值之间的相关性采用Spearman等级相关分析，P<0.05为差异有统计学意义。 结果：1 KLK6在上皮性良性卵巢肿瘤、交界性卵巢肿瘤及卵巢癌病人的组织中表达阳性率分别为15％(3/20)、63.6％(7/11)及61.3％(38/62)，良性卵巢肿瘤组阳性表达率明显低于后两组，差异均有统计学意义(P<0.01)，后两组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。在卵巢浆液性囊腺癌、黏液性囊腺癌及子宫内膜样癌中的阳性表达率分别为78.8％(26/33)、44.4％(8/18)、36.4％(4/11)，浆液性囊腺癌癌组分别与后两者比较，差异均有统计学意义(P<0.05)，而后两者间比较，差异无统计学意义(P>0.05，)；早期卵巢癌(Ⅰ、Ⅱ期)组织中表达阳性率(41.7％)，明显低于晚期卵巢癌(Ⅲ、Ⅳ期)组织中表达阳性率(73.1％)(P<0.05)；高分化者阳性率为40％(8/20)，明显低于中、低分化者阳性率71.4％(30/42)(P<0.05)。 2、KLK8在上皮性良性卵巢肿瘤、交界性卵巢肿瘤及卵巢癌病人的组织中阳性表达率分别为25％(5/20)、27.3％(3/11)及66.1％(41/62)，卵巢癌组阳性表达率明显高于前两组，差异均有统计学意义(P<0.05)，前两组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。在卵巢浆液性囊腺癌、黏液性囊腺癌及子宫内膜样癌中，阳性表达率分别为87.9％(29/33)、50％(9/18)、27.3％(3/11)，前者分别与后两者比较，差异均有统计学意义(P<0.05)，而后两者间比较，差异无统计学意义(P>70.05)；早期卵巢癌(Ⅰ、Ⅱ期)阳性表达率为83.3％(20/24)，明显高于晚期卵巢癌(Ⅲ、Ⅳ期)阳性表达率55.3％(21/38)(P<0.05)；高分化者阳性表达率为85％(17/20)，明显高于中、低分化者阳性表达率57.1％(24/42)(P<0.05)。 3、在上皮性良性卵巢肿瘤、交界性卵巢肿瘤及卵巢癌病人的血清中，hK6的表达水平分别为3.24±0.19、3.88±0.22、4.49±0.19(μg/L)；hK8表达水平分别为4.26±0.29、5.26±0.46、6.59±0.15(μg/L)；CA125表达水平分别为18.58±16.45、36.22±15.24、146.78±110.62，KLK6、KLK8、CA125表达水平在三组间均有差别，差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。经LSD-t检验两两比较，KLK6在卵巢良性肿瘤组表达水平均低于后两组，差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)，后两组比较，卵巢癌组表达水平高于交界性卵巢肿瘤组，差异有统计学意义(P<0.01)；KLK8卵巢癌组表达水平均高于前两组，差异均有统计学意义(两者均P<0.01)，前两组比较，差异无统计学意义(P>0.05)；CA125在良性肿瘤组表达水平均低于后两组，差异有统计学意义(P<0.05)，后两组比较，卵巢癌组表达水平高于交界性卵巢肿瘤组，差异有统计学意义(P<0.05)。 4、卵巢癌组织中KLK6、KLK8表达的A值分别为145.2±11.3、156.4±14.7，与血清浓度值之间均呈显著正相关关系，Spearman等级相关系数分别为0.31(P<0.05)、0.608(P<0.001)。 5、根据给定的阳性标准，hK6、hK8、CA125用于卵巢癌诊断的敏感度分别为66.1％、61.3％、69.4％，特异度分别为83.9％、77.4％、69.4％，三者敏感度和特异度比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。 结论：1 卵巢癌组织及血清中存在KLK6、KLK8蛋白表达升高。二者蛋白表达的改变与卵巢癌临床病理分期和恶性度有关，可作为一项监测卵巢癌病人预后的指标。在卵巢癌的进展过程中，KLK6表达升高，提示预后不佳，KLK8表达升高，提示预后良好。 2、卵巢癌病人血清hK6及hK8水平与卵巢癌组织中KLK6及KLK8的表达水平有关。 3、KLK6、KLK8参与上皮性卵巢癌的发生发展过程，血清hK6、hK8与CA125联合检测可指导卵巢癌的早期诊断及判断化疗疗效。 4、KLK6、KLK8由于其本身结构、分布与代谢的特殊性，使它们可能成为卵巢癌新的血清学肿瘤标志物，同时为上皮性卵巢癌的靶向治疗提供新的靶点。

目录

声明

摘要

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述：人组织激肽释放酶6和8及CA125对卵巢癌诊断及预后的价值

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