橡胶草的橡胶合酶基因TkCTP1异源表达的生物学效应研究

目录

第一章 文献综述

1 杜仲的研究进展

1.1杜仲胶的研究进展

1.2杜仲胶的合成途径

2 橡胶草橡胶的研究进展

2.1 橡胶草中天然橡胶合成部位

2.2 橡胶草中天然橡胶的合成过程

2.3 橡胶草基因CPT1的研究进展

3 研究内容、技术路线和目的意义

3.1研究内容

3.2技术路线

3.3目的意义

第二章 超量表达转TkCPT1基因烟草的功能验证

1 材料与试剂

1.1实验材料

1.2实验试剂及仪器

1.3主要溶液的配制

2 实验方法

2.1植物表达载体构建

2.2大肠杆菌感受态细胞制备以及DNA转化

2.3质粒DNA提取

2.4农杆菌感受态细胞制备及DNA转化

2.5农杆菌菌液PCR鉴定

2.6菌种保存

2.7 遗传转化

2.8 烟草植株总RNA的提取

2.9 Real time-PCR反应

3 结果分析

3.1植物表达载体的获得

3.2转TkCPT1基因烟草植株鉴定

3.3野生型烟草和转基因烟草农艺性状测定

3.4 转基因烟草相关基因的表达分析

4 讨论

第三章 超量表达TkCPT1基因合成橡胶的研究

1 材料与试剂

1.1实验材料

1.2实验试剂及仪器

1.3主要溶液的配制

2 实验方法

2.9杜仲遗传转化体系优化

2.10杜仲再生芽微嫁接体系的建立

2.11杜仲的遗传转化

2.12杜仲植株DNA提取与PCR鉴定

2.13转基因杜仲与野生型杜仲代谢组

2.14 杜仲胶结构的测定

3结果分析

3.1杜仲遗传转化体系优化

3.2杜仲再生芽微嫁接体系的建立

3.3农杆菌介导杜仲遗传转化体系的建立

3.4转TkCPT1基因杜仲与野生型杜仲代谢组分析

3.5 红外光谱检测转TkCPT1基因杜仲与野生型杜仲胶的结构

4 讨论

第四章 结论与展望

1 结论

1.1植物表达载体的构建

1.2转基因烟草的获得以及相关性状的测定

1.3杜仲遗传转化体系的优化

1.4 杜仲再生芽的微嫁接

1.5转基因杜仲与野生型杜仲代谢组分析

1.6 转基因杜仲胶结构分析

2 展望

参考文献

附录

致谢

声明