引 言
第一章 文献综述
1.1 长顺绿壳蛋鸡概述
1.2 家禽蛋壳形成机制
1.2.1 蛋壳的形成
1.2.2 钙与蛋壳形成的关系
1.2.3 钙与脂的关系
1.3 蛋壳基质蛋白与蛋壳形成的关系
1.4.1 OCX-32基因结构与功能
1.4.2 OCX-32基因与家禽生产性能的关系
1.5 蛋壳基质蛋白OC-116研究现状
1.5.1 OC-116基因结构与功能
1.5.2 OC-116基因与与家禽生产性能的关系
1.6 目的与意义
第二章 OCX-32基因mRNA表达和SNPs对长顺绿壳蛋鸡蛋壳品质的影响
2.1 试验材料
2.1.1样品采集
2.1.2 试验仪器
2.1.3 试验试剂
2.1.4 主要溶液配制
2.1.5 引物设计
2.2 试验方法
2.2.1 总RNA提取及cDNA合成
2.2.2 基因组DNA提取
2.2.3 蛋壳品质测定
2.2.4 RT-qPCR扩增
2.2.5 多态引物的PCR扩增及SNP鉴定
2.2.6 生物信息学分析
2.3 数据统计
2.4 结果与分析
2.4.1 RNA提取质量与表达引物特异性检测结果
2.4.2 OCX-32基因mRNA组织表达谱检测结果
2.4.3 OCX-32基因多态引物的PCR扩增结果
2.4.4 OCX-32基因SNPs鉴定
2.4.5 OCX-32基因SNP位点连锁不平衡分析
2.4.6 OCX-32基因SNP位点群体遗传分析
2.4.7 OCX-32基因SNP位点单倍型和双倍型分析
2.4.8 OCX-32基因外显子SNP位点对mRNA二级结构的影响
2.4.9 OCX-32基因错义突变对OCX-32蛋白质结构的影响
2.4.10 OCX-32基因SNPs对长顺绿壳蛋鸡品质的影响
2.5 讨论
2.5.1 OCX-32基因mRNA组织表达差异
2.5.2 OCX-32基因对家禽蛋壳品质影响
第三章 OC-116基因mRNA表达和SNPs对长顺绿壳蛋鸡蛋壳品质的影响
3.1 试验材料
3.1.1 试验样品采集
3.1.2 试验仪器
3.1.3 试验试剂
3.1.4 主要溶液配制
3.1.5 引物设计
3.2 试验方法
3.3 数据统计
3.4 结果与分析
3.4.1 OC-116基因表达引物的特异性检测结果
3.4.2 OC-116基因mRNA组织表达谱检测结果
3.4.3 OC-116基因多态引物的PCR扩增结果
3.4.4 OC-116基因SNP位点鉴定
3.4.5 OC-116基因SNP位点连锁不平衡分析
3.4.6 OC-116基因SNPs位点群体遗传分析
3.4.7 OC-116基因SNPs位点单倍型和双倍型分析
3.4.8 OC-116基因外显子SNP位点对mRNA二级结构的影响
3.4.9 OC-116基因错义突变对OC-116蛋白质结构的影响
3.4.10 OC-116基因SNP位点与长顺绿壳蛋鸡品质的相关性分析
3.5 讨论
3.5.1 OC-116基因mRNA组织表达差异
3.5.2 OC-116基因对家禽蛋壳品质影响
第四章 OCX-32和OC-116基因表达载体构建及其对鸡子宫上皮细胞Ca2+含量的影响
4.1 试验材料
4.1.1 试验动物
4.1.2 试验仪器
4.1.3 试验试剂
4.1.4 主要溶液配制
4.2 试验方法
4.2.1 真核表达载体引物设计
4.2.2 真核表达载体构建
4.2.3 子宫上皮细胞的分离培养
4.2.4 子宫上皮细胞间接免疫荧光鉴定
4.2.5 转染子宫上皮细胞
4.2.6 子宫上皮细胞内钙Ca2+浓度测定
4.2.7 基因表达量和脂质指标的检测
4.3 数据统计
4.4 结果与分析
4.4.1 真核表达载体的构建
4.4.2 子宫上皮细胞形态学观察
4.4.3 子宫上皮细胞间接免疫荧光鉴定
4.4.4 真核表达载体转染结果
4.4.5 探针法对子宫上皮细胞内Ca2+染色效果鉴定
4.4.6 子宫上皮细胞Ca2+浓度测定结果
4.4.7 OCX-32基因过表达量与Ca2+及脂质指标的相关性分析
4.4.8 OC-116基因过表达量对Ca2+浓度及脂质指标的相关性分析
4.5 讨论
4.5.1 OCX-32基因表达对胞内Ca2+浓度及脂质指标的影响
4.5.2 OC-116基因表达对胞内Ca2+浓度及脂质指标的影响
第五章 小 结
5.1 结 论
5.2 创新点
5.3 研究展望
参考文献
致谢
附 录
附录 Ⅰ 硕士研究生在读期间发表的论文及申请专利
附录 Ⅱ 硕士研究生在读期间参与项目及获得的奖项
附录 Ⅲ 部分英文缩略词
附录 Ⅳ 部分试验图片
声明
贵州大学;
