长顺绿壳蛋鸡的选育与蛋壳颜色相关基因表达规律的研究

摘要

长顺绿壳蛋鸡是贵州特有的一个地方品种，为了更好的保护和利用该品种，有必要对长顺绿壳蛋鸡进行选育，筛选出纯合绿壳蛋鸡。本试验随机抽取1690只长顺绿壳蛋鸡为研究对象，以绿壳基因（Oocyan,O）作为候选基因，设计3条特异性引物，应用多重PCR技术筛选长顺绿壳蛋鸡中纯合基因型。在筛选出的绿壳蛋鸡群体中，选取70周龄长顺绿壳蛋鸡9只（每种基因型3只），采集每只鸡的大脑、肝脏、肾脏、卵巢、输卵管和子宫组织，提取其总RNA进行反转录，利用实时荧光定量PCR方法检测样品中HO-1基因和SLCO1C1基因的表达水平，比较同一组织不同基因型及同一基因型不同组织间HO-1基因和SLCO1C1基因mRNA的表达差异。同时，检测三种不同基因型绿壳蛋鸡所产鸡蛋中胆绿素含量。结果显示：
　　1.在试验群体中，显性纯合绿壳蛋鸡个体为423，隐形纯合白壳蛋鸡个体为153，其余的基因型个体为杂合绿壳蛋鸡个体(1114)。对该基因位点进行遗传特性分析，发现该位点属中度多态，且该位点在本群体中未达到Hardy-Weinberg平衡状态，这可能跟本群体经过了一定的选育有关。群体杂合基因型偏高，占67.21%，杂合子会在后代出现性状分离，所以有必要提高群体纯合绿壳基因频率和纯合基因型频率，从而提高群体绿壳蛋率，增加经济效益。
　　2.在同一组织不同基因型及同一基因型不同组织间HO-1基因的表达都达到了显著（P＜0.05）；其中HO-1基因在肝脏中表达量最高，且3种基因型间肝脏表达量存在极显著差异（P＜0.01）；白壳蛋鸡子宫中表达量极显著高于其他两种（P＜0.01），纯合绿壳蛋鸡与杂合绿壳蛋鸡无显著差异（P＞0.05）。
　　3.在同一组织不同基因型及同一基因型不同组织间SLCO1C1基因的表达都达到了显著（P＜0.05）；其中SLCO1C1基因在输卵管中表达量最高，且3种基因型间输卵管表达量存在极显著差异（P＜0.01）；白壳蛋鸡卵巢中表达量极显著高于其他两种（P＜0.01），纯合绿壳蛋鸡与杂合绿壳蛋鸡无显著差异（P＞0.05）。
　　4.胆绿素在三种不同基因型绿壳蛋鸡中的含量差异极显著，纯合绿壳蛋鸡高于杂合绿壳蛋鸡和纯合白壳蛋鸡。

目录

前言

第一章 文献综述

1.1 我国养鸡现状

1.2 长顺绿壳蛋鸡的现状

1.3 蛋壳色素

1.4 分子标记辅助选择

1.5 Oocyan基因

1.6 实时荧光定量PCR

1.7 HO-1基因研究进展

1.8 OATP1C1基因研究进展

1.9 研究目的和意义

第二章 材料与方法

2.1 材料与方法

2.2 试验方法

第三章 结果与分析

3.1 基因组DNA检测

3.2 总RNA提取检测

3.3 实时荧光定量PCR

3.4 胆绿素与原卟啉的标准曲线

第四章 讨论

4.1 绿壳基因遗传学分析

4.2 HO-1基因的表达

4.3 SLCO1C1基因的表达

4.4 蛋壳中胆绿素的测定

第五章 结论

参考文献

致谢

附录1：

附录2：

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