田七注射液对阿霉素肾纤维化大鼠的PDGF-BB/TGF-β1/Smads信号通路的影响

摘要

目的:观察田七注射液对阿霉素(ADR)肾病大鼠肾脏血小板衍生生长因子(PDGF-BB)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smads蛋白表达的影响，探讨田七注射液对ADR大鼠肾脏纤维化的作用机制。　　 方法:将清洁级(Sprasue-Dawley)SD雄性大鼠80只，随机分为四组:正常组、对照组、模型组、田七注射液治疗组（以下简称田七组），每组20只。除正常组外，其余三组均行右肾切除术，对照组术后不注射阿霉素，予生理盐水(1.5ml/100g·d)腹腔注射;模型组于术后第7天及术后第30天分别尾静脉注射阿霉素5mg/kg、3mg/kg建立阿霉紊肾纤维化犬鼠模型，造模后予生理盐水(1.5ml/100g·d)腹腔注射;田七组按上法造模后，予田七注射液(1.5ml/100g·d)腹腔注射给药，连续给药8周后，与其他三组同时处死。处死前收集腹主动脉血和肾脏组织标本。观察实验大鼠治疗前后的体重与一般状况;在给予田七注射液的第2、第4、第6和第8周后分别于各组设置代谢笼，留取24小时尿液。采用磺柳酸-硫酸钠比浊法检测24小时尿蛋白定量;采用全自动生化分析仪检测大鼠血清尿素氮(BUN)和血肌酐(Scr)，观察肾功能变化。取各组大鼠肾组织行苏木素伊红染色（HE）和马松染色(Masson)，光镜下观察肾脏病理变化;采用免疫组化法检测肾组织中PDGF-BB、TGF-β1、Smad3、Smad7蛋白表达水平。　　 结果:(1)各组大鼠一般情况:与对照组大鼠相比模型组大鼠活力明显减退、体重下降、畏寒、食欲差、舌质瘀紫、尾色瘀青，差异具有统计学意义(P＜0.05)。田七组大鼠的进食量、活动度、灵敏度略优于模型组，恶寒怕冷现象不明显，舌质瘀紫、尾色瘀青程度有所改善，且体重下降速度较模型组慢。(2)各组大鼠24h尿蛋白定量结果:模型组及田七组肾纤维化大鼠24h尿蛋白定量均较对照组明显升高（P＜0.01）;与模型组比较，田七组24h尿蛋白定量明显减少，差异有统计学意义(P＜0.05)。(3)各组大鼠生化检测结果:田七组和模型组大鼠的BUN、Scr均显著高于对照组(P＜0.01);与模型组相比，田七组BUN、Scr有所降低（P＜0.05）。(4)各组大鼠肾脏病理切片显示:与对照组相比，模型组的肾脏肿大，颜色变浅，有囊性感。肾脏剖面，模型组的肾脏实质明显变薄，呈囊状，颜色暗红，表面粗糙不平，有囊肿和瘢痕。缺血状，以肾皮质为重，光镜下肾小管上皮细胞扁平，细胞崩解、脱落，伴细胞再生;肾小管基膜增厚，管腔扩张，内可见细胞的崩解碎屑;肾间质可见淋巴-单核细胞浸润，伴细胞外基质(ECM)沉积;部分肾小球有新月体形成，部分肾小球出现局灶硬化;而田七组的肾脏病理改变明显轻于模型组;与模型组比较，田七组肾小球硬化指数及肾间质损伤分数明显下降（P＜0.01）。(5)各组大鼠免疫组化法检测结果:与对照组比较，模型组PDGF-BB、TGF-β1、Smad3表达显著上调（P＜0.01），Smad7表达显著下调（P＜0.01）;与模型组比较，田七注射液治疗组肾组织PDGF-BB、TGF-β1、Smad3表达显著下调（P＜0.01），Smad7表达显著上调（P＜0.01）。　　 结论:(1)田七注射液可以降低ADR肾纤维化大鼠的BUN、Scr，减少尿蛋白，改善肾脏病理损伤，对肾脏有保护作用。(2)田七注射液的作用机制可能是通过影响PDGF-BB蛋白的表达，下调TGF-β1、Smad3蛋白的表达，上调Smad7蛋白的表达，达到延缓肾纤维化进展的目的。

目录

中英文缩略词汇表

摘要

引言

1 实验材料和方法

1．1 实验材料

1．2 实验方法

2 实验结果

2．1 各组大鼠的一般情况

2．2 各组大鼠死亡情况

2．3 各组大鼠肾组织肉眼观察结果

2．4 各组大鼠尿蛋白的比较

2．5 各组大鼠BUN和Scr的比较

2．6 各组大鼠肾组织病理改变的比较

2．7 各组大鼠肾组织免疫组化的比较

3 讨论

3．1 现代医学对肾纤维化的研究

3．1．1 肾纤维化的形成机制

3．1．2 PDGF-BB/TGF-β1/Smads信号传导通道与肾纤维化

3．2 祖国医学对肾纤维化概念的认识

3．3 中医对慢性肾衰竭的病因病机认识

3．4 中医药对肾纤维化的防治

3．5 田七抗肾纤维化的研究

4 存在的问题与展望

结论

参考文献

附录

综述 血小板衍生生长因子与肾脏疾病的研究进展

致谢

攻读学位期间发表的学术论文目录

声明

个人简历