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中药防哮饮对哮喘小鼠血清IL-18含量影响的研究

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引言

正文

1 实验材料和方法

1.1 实验动物

1.2 主要药品及试剂

1.3 主要仪器和设备

2 实验方法及步骤

2.1 主要药物的配制

2.2 动物的分组及给药

2.3 哮喘模型的制备方法

2.4 取材及标本处理

3 观察指标及检测方法

3.1 各组小鼠的一般情况及行为学评分原则

3.2 小鼠血清IL-18的检测方法

3.3 统计学处理

4 实验结果

4.1 各组小鼠一般情况及行为学评分

4.2 中药防哮饮对哮喘小鼠血清IL-18的含量的影响:

5 讨论

5.1 祖国医学对哮喘的认识

5.2 现代医学对支气管哮喘的认识

5.3 中药防哮饮组方配伍分析

6 动物模型的评价

6.1 实验动物的选择

6.2 变应原选择

6.3 哮喘模型的制作方法

7 存在问题与展望

结论

参考文献

综述

致谢

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摘要

目的:本研究旨在通过哮喘小鼠模型,观察中药“防哮饮”早期干预治疗对哮喘小鼠血清白细胞介素-18(IL-18)含量的影响,以便从免疫学角度、细胞因子水平初步探究中药“防哮饮”早期干预治疗哮喘的作用机制,为临床用药提供理论和实验依据。  实验方法:将72只健康昆明小鼠随机分为6组(每组12只):A正常对照组、B哮喘模型组、C防哮饮小剂量组(10g/kg〃d)、D防哮饮中剂量组(30g/kg〃d)、E防哮饮大剂量组(50g/kg〃d)、F布地奈德(BUD)组。用药量分别按动物体表面积换算。B、C、D、E、F组:于第1天和第14天分别腹腔注射10%卵白蛋白(OVA)悬浊液0.1ml及佐剂10%氢氧化铝悬浊液0.2ml致敏。于第21天起将各组小鼠放于密闭容器(20cm、40cm、50cm)内分别使其雾化吸入5%OVA悬浊液30分钟,每天1次,共7天。A组:以生理盐水代替OVA和氢氧化铝于第1天、第14天腹腔注射0.3ml,并且以生理盐水代替OVA于第21天起使小鼠雾化吸入30分钟,每天1次,共7天;C、D、E组从第1天起,分别将中药防哮饮按小剂量、中剂量、大剂量配制并以灌胃的方式给药,20ml/kg〃d,每天1次,共27天;A组、B组以等量生理盐水灌胃。F组从第一天起雾化吸入BUD(1.0mg/支)1.0mg/次,每天2次,共27天。本实验以B组小鼠出现喷嚏、抓鼻、喘息、烦躁不安、伏卧不动、呼吸急促、腹肌痉挛、倚笼而立、大小便失禁等为阳性表现,说明哮喘造模成功。各组小鼠在最后1次激发24h后(第28天)摘眼球取血约1.0ml,离心提取血清,采用双抗夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测外周血中IL-18的含量。  结果:正常对照组、防哮饮各剂量组、BUD组与哮喘模型组相比,小鼠血清IL-18的含量均明显高于哮喘模型组,差异具有非常显著的统计学意义(P均<0.01);防哮饮小剂量、大剂量、BUD组小鼠血清IL-18的含量与正常对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);防哮饮中剂量组与正常对照组相比,小鼠血清IL-18的含量偏高,差异具有统计学意义(P<0.05);防哮饮小剂量组与BUD组相比,小鼠血清IL-18的含量变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05);防哮饮中剂量组与BUD组相比,小鼠血清IL-18的含量明显升高,差异具有非常显著的统计学意义(P<0.01);防哮饮大剂量组小鼠血清IL-18的含量高于BUD组,差异具有统计学意义(P<0.05);防哮饮中剂量组小鼠血清IL-18的含量高于防哮饮小剂量组、防哮饮大剂量组,差异具有统计学意义(P<0.05);防哮饮小剂量组小鼠血清IL-18的含量与防哮饮大剂量组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。  结论:(1)哮喘模型组小鼠血清IL-18的含量明显低于正常对照组,提示小鼠哮喘的发生可能与血清IL-18的含量降低有关,推测IL-18对哮喘可能有保护作用;  (2)中药防哮饮有上调哮喘小鼠血清IL-18水平的作用,减轻了哮喘小鼠的症状,控制了哮喘的发生和发作,可能是其防治哮喘的作用机制之一;  (3)布地奈德有上调哮喘小鼠血清IL-18水平的作用,减轻了哮喘小鼠的症状,控制了哮喘的发生和发作,可能是其防治哮喘的作用机制之一。

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