黄芪注射液对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑内氧自由基的影响

摘要

目的：观察黄芪（Astragalus）对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑内丙二醛(malondialdehyde，MDA）含量、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidese，GSH-PX)活力的影响，并观察神经行为学评分、病理学的变化，探讨黄芪对脑缺血再灌注损伤保护作用的可能机制。　　方法：取健康50只8-10周240-280g的健康Wistar大鼠（雌雄各半）按随机数字表法随机分成5组，每组10只：①缺血再灌注模型组(IM组）：参照改良的Zea-Longa大脑中动脉线栓法[1]制备大鼠短暂性局灶性脑缺血模型，造模成功后给予生理盐水3ml/kg；②假手术组（SO组）：模型制作步骤同IM组，但栓线仅插入颈总动脉10mm，给予生理盐水3ml/kg；③红花注射液阳性药物对照组（IM+SAR组）：模型制作步骤同IM组，采用红花注射液3ml/kg(相当于临床上红花高量)，用生理盐水稀释到3ml腹腔注射；④黄芪注射液低剂量组(IM+LASS组)：模型制作步骤同IM组，采用黄芪注射液2ml/kg，用生理盐水稀释到3ml腹腔注射；⑤黄芪注射液高剂量组(IM+HASS组)：模型制作步骤同IM组，采用黄芪注射液6ml/kg，用生理盐水稀释到3 ml腹腔注射。以上各组造模前6天开始，每天给药1次，连续6天，第7天按文献方法制备脑缺血/再灌注模型。制备脑缺血/再灌注模型成功后，各组即给予相应药物，在MCAO2 h再灌注6h后观测大鼠的神经行为学[2]评分，评分结束后迅速将大鼠断头处死，取脑，光镜下观察HE染色后脑组织病理学变化，制备脑组织匀浆并应用分光光度计检测脑组织MDA含量和SOD、GSH-PX活性。　　结果：1、SO组大鼠无明显神经功能缺损，IM组及IM+SAR组、IM+LASS组、IM+HASS组均有不同程度的神经功能缺损，其神经行为学评分分别为(2.78±0.45)、(1.82±0.71)、(2.06±0.66)、(1.80±0.69)，并且与IM组比较，IM+SAR组、IM+LASS组、IM+HASS组神经行为学评分均减少，差异均有统计学意义(P<0.05)；IM+SAR组与IM+LASS组比较，差异有统计学意义(P<0.05)；IM+SAR组与IM+HASS组比较，差异无统计学意义(P>0.05)。2、S0组HE染色可见到正常神经元的形态，包括胞体、轴突、树突都清晰可见，胞浆丰富、均匀，核呈多角形或椭圆形。说明假手术组的手术因素没有对大鼠大脑神经元产生损伤。IM组脑缺血再灌注6h后可见大量神经元坏死，核溶解成碎片，说明没有进行药物干预的模型组脑缺血再灌注神经损伤严重。IM组及IM+SAR组、IM+LASS组、IM+HASS组、跟SO组比较神经元有损伤，可见到胞核固缩，核仁不清楚。但跟SO组相比细胞间隙要小，细胞形态基本可辨，无大量神经元死亡，说明药物对脑缺血再灌注损伤神经元细胞产生了一定的保护作用。3、与SO组MDA含量（6.18±0.84），SOD(213.27±43.65)、GSH-PX（29.91±4.79）活力比较，IM组脑组织MDA含量(11.49±0.91)升高，SOD(110.83±26.49)、GSH-PX(13.41±3.82)活力降低；IM+SAR组MDA含量(8.27±0.89)下降，SOD(189.76±30.56)、GSH-PX(23.74±3.65)活力升高；IM+LASS组MDA含量(9.45±0.76)下降，SOD(147.24±23.77)、GSH-PX(19.85±4.01)活力升高；IM+HASS组MDA含量(8.06±0.93)下降，SOD(192.36±29.14)、GSH-PX(24.22±3.93)活力升高，差异均有统计意义(P<0.05)。IM+SAR组MDA含量与IM+LASS组MDA含量比较，差异有统计学意义（P<0.05)，与IM+HASS组MDA含量比较，差异无统计学意义(P>0.05)；IM+SAR组SOD活力与IM+LASS组SOD活力比较，差异有统计学意义（P<0.05)，与IM+HASS组SOD活力比较，差异无统计学意义(P>0.05)；IM+SAR组GSH-PX活力与IM+LASS组GSH-PX活力比较，差异有统计学意义(P<0.05)，与IM+HASS组GSH-PX活力比较，差异无统计学意义(P>0.05）。　　结论：①脑缺血再灌注时存在氧化应激增强，而且组织清除氧自由基能力下降。②黄芪可以改善大鼠局灶性脑缺血引起的神经行为障碍，减轻缺血再灌注大鼠的脑梗死缺血区神经元坏死及水肿，具有神经保护作用。③黄芪可以降低脑缺血再灌注大鼠脑内MDA含量，并提高SOD、GSH-PX活力，增强机体清除自由基的能力，而发挥对脑缺血再灌注时的保护作用。

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引言

正文1 实验材料和方法

1.1 实验材料

1.2 实验方法

2 结 果

2.1 黄芪对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠神经行为学变化的影响

2.2 病理形态学观察

2.3 黄芪对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑内MDA含量，SOD，GSH-PX活性的影响

3 讨 论

3.1 祖国医学对缺血性中风的认识

3.2 现代医学的相关认识

3.3 祖国医学对黄芪益气活血功效的记载

3.4 对脑缺血再灌注及氧自由基的认识

3.5 黄芪主要化学成分均能抗氧自由基

3.6 造模成功与否是本实验的关键

3.7 小结

4 存在的问题和展望

结论

参考文献

附录

缩 略 词 表

综述

致谢

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