夜香树花提取物抗肿瘤作用的实验研究

摘要

目的：确定夜香树花（简称：CN花）提取物中的有效部位，探讨其在体内体外抗肿瘤作用和诱导肿瘤细胞凋亡的作用、以及对脾免疫细胞的影响。　　方法：　　1.先后用95％乙醇和50%乙醇对 CN花进行回流提取得浸膏，再按极性递增原则回流提取得到石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、95%乙醇五个不同的部位；　　2.对不同部位（包括总提取物）进行体外抗肿瘤的实验研究：即通过MTT法和集落形成法，观察其对人胃癌细胞 SGC7901、黑色素瘤细胞B16、人肝癌细胞 Bele7404、白血病细胞 L1210和P388、人宫颈癌细胞 Hela增殖的影响情况，并通过倒臵显微镜观察细胞形态，确定出有效部位；　　3.对有效部位进行急性毒性实验，确定出最大耐受量或LD50，为进行下一步研究奠定基础；　　4.对有效部位的含药血清进行体外抗肿瘤作用的实验研究，初步判定其在体内是否具有抑制肿瘤的作用，为下一步将肿瘤移植到动物体内进行体内抗肿瘤实验奠定基础；　　5.对有效部位进行体内抗肿瘤的研究：即建立 H22实体瘤和S180腹水瘤模型，观察其对H22实体瘤增殖的影响和对S180荷瘤小鼠生命延长率的影响；　　6.对有效部位进行小鼠脾脏淋巴细胞增殖反应的研究，观察其对脾免疫细胞的影响；　　7.对有效部位进行体内体外诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究，观察其在体外和体内对肿瘤细胞周期及细胞凋亡的影响。　　结果：　　1.总提取物、正丁醇部位、95%乙醇部位在体外对人胃癌细胞SGC7901、黑色素瘤细胞B16、人肝癌细胞Bele7404、白血病细胞L1210和P388、人宫颈癌细胞He la的增殖有较好的抑制作用，且有效成分主要集中在正丁醇部位和95%乙醇部位；　　2.总提取物的LD50>10g/kg，表明其毒性小或潜在危险小；　　3. CN花总提取物的含药血清在体外可较好的抑制宫颈癌细胞 Hela的增殖，表明其可能在体内对肿瘤具有抑制作用，为下一步将肿瘤移植到动物体内进行体内抗肿瘤实验奠定基础；　　4.总提取物、正丁醇部位、95%乙醇部位可抑制小鼠H22实体瘤的增殖，也可明显提高S180小鼠的生命延长率；　　5.总提取物、正丁醇部位和95%乙醇部位可促进 ConA、LPS诱导状态下的脾T、B淋巴细胞的增殖，浓度约为20μg/ml下效果最显著；　　6. FCM法检测显示：总提取物在体内，可能是通过阻断H22实体瘤细胞和S180腹水瘤细胞由G0/G1期进入S期，而诱导细胞凋亡；在体外，可能是通过阻断宫颈癌细胞Hela由S期进入G2/M期，而诱导细胞凋亡。　　结论：总提取物、正丁醇部位和95%乙醇部位在体外对不同组织来源的肿瘤细胞的增殖具有明显的抑制作用；CN花总提取物的LD50较大，其毒性较小；CN花总提取物的含药血清在体外可较好的抑制宫颈癌细胞Hela的增殖；总提取物、正丁醇部位和95%乙醇部位在体内可抑制荷瘤小鼠的瘤体的生长，明显延长荷瘤小鼠的存活期；对诱导状态下的脾T、B淋巴细胞的增殖有一定的促进作用；CN花总提取物在体内可能是通过阻断H22实体瘤细胞和S180腹水瘤细胞由G0/G1期进入S期，从而诱导细胞凋亡，在体外可能通过阻断宫颈癌细胞Hela由S期进入G2/M期，从而诱导细胞凋亡。

目录

封面

目录

中文摘要

英文摘要

引言

正文第一节 CN花不同部位的提取分离制备

1 实验器材