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水溶性蜂胶组分对大鼠心脏功能及小鼠学习记忆损伤的作用研究

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声明

前言

第一节:蜂胶简介

第二节:冠状动脉和心血管疾病

第三节:阿尔茨海默病及研究方法

立题依据

实验材料和方法

1.实验材料和药品

2.水溶性蜂胶衍生物(WSDP)的制备和分析

3.Langendorff离体心脏灌流实验

4.水溶性蜂胶减轻D-半乳糖+亚硝酸钠引起的小鼠学习记忆损伤

5.统计方法

结果

1.水溶性蜂胶衍生物(WSDP)的主要成分

2.Langendorff离体心脏灌流实验

3.水溶性蜂胶衍生物(WSDP)减轻D-半乳糖+亚硝酸钠引起的小鼠学习记忆损伤

讨论

1水溶性蜂胶衍生物(WSDP)对离体大鼠心脏的作用

2.L-Arg对离体大鼠心脏的作用

3.水溶性蜂胶衍生物(WSDP)减轻D-半乳糖+亚硝酸钠引起的小鼠学习记忆损伤

参考文献

硕士在读期间发表论文

致谢

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摘要

蜂胶是蜜蜂采集植物的树脂分泌物与蜂蜡等经咀嚼调制而成的一种树脂状物质。水溶性蜂胶(WSDP)是指加入助溶剂后可溶于水的蜂胶组分。本项研究首次观察了水溶性蜂胶对大鼠心脏功能的影响。大鼠Langendorff离体心脏灌流实验结果表明水溶性蜂胶(100~800μg)可剂量依赖性地对离体大鼠心脏产生显著的双相调节作用,即快速的一过性正性变时/变力作用(第Ⅰ相)和持久的负性变时/变力作用(第Ⅱ相)。其中可以确定第Ⅱ相的正性变时/变力作用由水溶性蜂胶中的左旋精氨酸(L-Arg)诱导;而第Ⅱ相的负性变时/变力作用可能与蜂胶黄酮的钙拮抗活性相关。而一氧化氮合酶抑制剂L-NAME、冠状动脉内皮的去除并不会影响它的这种作用。在体实验也证明水溶性蜂胶可以显著地降低麻醉大鼠的心率(第Ⅱ相调节作用)。 水溶性蜂胶主要由蜂胶黄酮(25%)和L-Arg(75%)组成,我们进一步研究了L-Arg对Langendorff灌流大鼠心脏的作用。结果表明L-Arg(0.25~3umol)对离体大鼠心脏有显著的正性变时/变力作用,它可剂量依赖性的增加离体大鼠心脏的心率(HR)、左室压(LVP)、左室压最大上升速率(dMax/dt)和左室压最大降低速率(dMin/dt)。去除冠状动脉内皮、一氧化氮合酶抑制剂L-NAME、β-肾上腺素受体拮抗剂心得安、腺苷酸环化酶抑制剂SQ22536都不会影响L-Arg的这种正性变时/变力作用。观察多种氨基酸对照,结果发现在生理PH条件下(7.4)侧链带正电性的氨基酸L-Arg、 D-Arg、 L-Lys、L-His都对离体灌流心脏表现出类似的作用;侧链带负电性的氨基酸L-Glu、L-Asp对离体心脏表现出负性变时/变力作用;而其它氨基酸对心脏无显著作用。用与L-Arg、 L-Glu等酸碱度的NaOH和HCl不能模拟出这种作用。因此,我们推测L-Arg对离体心脏的作用是非NO-和非PH依赖的,而是与其侧链上所带的电荷有关。 本文第二部分研究了水溶性蜂胶对小鼠学习记忆损伤的保护作用。用D-半乳糖(200mg/kg)+NaNO2(100mg/kg)的联合诱导法诱导小鼠学习记忆损伤。采用水迷宫实验中的掩藏平台学习训练法检测了水溶性蜂胶对小鼠空间学习记忆能力的影响,用光学显微镜观察了小鼠脑海马区神经元的形态学变化。实验结果表明D-半乳糖+ NaNO2可显著的诱导小鼠空间学习记忆能力的下降,并造成其脑海马区神经元损伤;100mg/kg的WSDP可显著性地减轻D-半乳糖+NaNO2诱导的学习记忆损伤,保护受试小鼠脑海马区神经元。

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