原发性家族性脑钙化症致病基因XPR1分子机制研究及纹状体Slc20a2基因敲除小鼠模型构建

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英文缩略词表

引言

第一部分 原发性家族性脑钙化症XPR1基因突变筛查研究

材料与方法

1. 研究对象

2．主要实验材料、试剂及仪器

3. 实验方法

结果

1 在2个PFBC家系分别检测出2个XPR1 基因新发突变

2.XPR1突变与PFBC临床表型

讨论

第二部分 突变型XPR1对细胞蛋白定量定位的影响

材料与方法

一、主要实验材料、试剂及仪器

二、实验方法

结果

1. 成功构建突变型真核表达质粒

2.突变型XPR1对RNA表达的影响

3.突变型XPR1对蛋白表达的影响

4. 突变型XPR1蛋白影响亚细胞定位

讨论

第三章 突变型XPR1 对细胞钙磷转运功能的影响

材料与方法

1. 实验材料与试剂

2.实验仪器

3. 实验方法

4.统计学分析

结果

1. 突变型XPR1蛋白对细胞磷转运的影响

2.突变型XPR1蛋白对细胞钙转运的影响

讨论

第四部分 XPR1基因组织表达谱及与SLC20A2，PDGFRB， PDGFB相互作用研究

资料与方法

1. 实验动物

2. 实验试剂及仪器

3.实验方法

结果

1. XPR1基因组织表达谱分析

2. XPR1蛋白与SLC20A2， PDGFRB，PDGFB蛋白的相互作用

讨论

第五部分 纹状体 Slc20a2 基因敲除小鼠模型构建

资料与方法

1. 实验动物

2. 主要实验材料、器材及仪器?

3. 实验方法

结果

1. CRISPR/Cas9 打靶载体的活性检测，筛选出靶向Slc20a2基因的sgRNA

2. 重组构建AAV -sgRNA-CRE 病毒载体

3. 体外证实AAV-sgRNA-CRE 病毒载体具有CRE活性

4. 病毒（AAV-sgRNA-CRE）滴度测定结果

5. 立体定位法构建纹状体Slc20a2基因敲除小鼠模型

6. CRISPR/Cas9介导纹状体Slc20a2基因敲除效果检测

讨论

全文总结

本研究的不足之处与改进方案

参考文献

综述:原发性家族性脑钙化症遗传分子学研究进展

在学期间发表文章

致谢