中国水仙类黄酮合成途径bHLH转录因子NtbHLH1的克隆及其功能研究

目录

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缩略词表

第一章 前言

1 中国水仙研究进展

2 植物花色产生的机制

2.1 植物类黄酮生物合成途径研究

2.2 植物类黄酮代谢途径

2.3 花青素途径

2.4 原花青素合成途径

2.5 黄酮醇合成途径

2.6 其他途径

3 类黄酮合成途径中调控基因研究概述

3.1 MYB转录因子概述

3.2 bHLH转录因子概述

3.3 WD40转录因子概述

3.4 MYB-bHLH-WD40复合物概述

4 其他因素对植物类黄酮合成途径的影响

4.1 光照的影响

4.2 温度的影响

4.3 其他因素的影响

5 本研究的内容和目的意义

5.1 目的意义

5.2 研究内容

第二章 中国水仙类黄酮途径 bHLH 基因克隆与表达分析

1 材料与方法

1.1 植物材料

1.2 主要试剂

1.3 仪器设备与耗材

1.4 实验方法

2 结果与分析

2.1 NtbHLH1的克隆

2.2 NtbHLH1基因 ORF 序列获得与分析

2.3 NtbHLH1的 ORF 扩增

2.4 NtbHLH1 蛋白质保守区的预测和分析

2.5 NtbHLH1基因编码氨基酸序列比对分析与系统进化树构建

2.6 NtbHLH1 蛋白氨基酸理化性质分析

2.7 NtbHLH1蛋白二级结构预测

2.8 NtbHLH1 蛋白的跨膜信号分析

2.9 NtbHLH1 蛋白信号肽预测分析

2.10 NtbHLH1蛋白蛋白磷酸化位点预测

2.11 NtbHLH1在中国水仙花不同发育阶段和不同部位的表达

3 讨论

第三章 NtbHLH1基因稳定转化烟草

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 试剂与试剂盒

1.3 培养基配制

1.4 NtbHLH1植物表达载体构建

1.5 烟草稳定转化

1.6 转基因烟草植株鉴定

1.9 转基因烟草植株实时荧光定量PCR分析

1.10 转基因烟草总黄酮的测定

1.11 转基因烟草花青素的测定

2 结果与分析

2.1 表达载体的构建

2.2 烟草稳定转化结果

2.3 转基因烟草植株的 PCR 检测结果

2.4 NtbHLH1转基因烟草植株表型观察及 q-PCR 分析结果

2.5 NtbHLH1 转基因烟草植株总黄酮含量

2.6 NtbHLH1转基因烟草植株花青素含量

3 讨论

第四章 酵母双杂研究 NtbHLH1 与七个 R2R3-MYB 蛋白的互作

1. 材料与方法

1.1菌株及载体

1.2试剂

1.3 培养基配制

1.4方法

2. 结果与分析

2.1 重组质粒的载体的构建

2.2重组载体自激活鉴定以及毒性检测

2.3 pGBKT7-NtbHLH1 与七个 R2R3-MYB 的互作验证

3 讨论

第五章 利用双荧光素酶互补实验研究 NtbHLH1 的功能

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 试剂与试剂盒

1.3 仪器

1.4方法

2 结果与分析

2.1 NtbHLH1 和七个 R2R3-MYB 调控 NtFLS表达分析

3.2 NtbHLH1 和七个 R2R3-MYB 调控 NtLAR表达分析

3.1 NtbHLH1 和七个 R2R3-MYB 调控 NtDFR表达分析

3. 讨论

第六章 结论与展望

参考文献

攻读学位期间的学术论文与研究成果

致谢