无花果叶类黄酮提取、纯化、鉴定及抗氧化研究

摘要

本研究以无花果叶片为材料，优化了超声波辅助提取无花果叶类黄酮的方法和工艺。探讨了利用大孔树脂分离纯化无花果叶类黄酮的最佳条件。从清除羟自由基（·OH）、超氧阴离子（O2－·）、DPPH自由基及还原能力这4个方面研究了无花果叶类黄酮提取物的抗氧化能力采用高效液相色谱-质谱仪，分析了无花果叶中类黄酮的组成。研究结果如下：　　一、采用响应面法对类黄酮的超声提取工艺进行优化。提出了超声波辅助法提取无花果叶类黄酮的最优条件，为无花果叶的充分利用奠定了理论基础。其中单因素实验考察了乙醇浓度、超声提取时间、液料比3个因素对无花果类黄酮提取率的影响，其后以响应面法做优化组合实验。分析表明，提取最佳条件为420w超声功率下，乙醇浓度35.48%，超声提取33 min，液料比59：1可获得最高提取率，预测提取率为34.8 mg/g。　　二、以无花果叶类黄酮的吸附率、解析率为指标，考察了7种大孔吸附树脂对无花果：类黄酮的分离纯化性能，筛选出最佳大孔吸附树脂。结果表明，D101型大孔树脂无论在吸附还是解析率上都有较优表现。其后以单因素实验考查了吸附时间、解析浓度、吸附液pH值、解吸液pH值，洗脱体积等对大孔树脂的解吸附的影响。结果表明，D101型大孔树脂合适的吸附解析条件为样品pH1进行吸附，以pH3浓度90%的乙醇为洗脱剂，以12 mL洗脱液洗脱1 g吸附饱和的树脂的量计算所需洗脱溶剂体积为好。　　三、无花果叶乙醇提取物的乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、剩余水相部分在不同浓度下对DPPH自由基、超氧阴离子、羟基自由基清除作用及还原性进行实验。结果表明，不同萃取物对三种自由基均有清除作用，且均具有还原性。随着样品浓度的增加，清除作用及还原能力均变强。且在未达到饱和清除之前均具有较好的线性相关。在与对照Vc实验中发现，3种萃取物在清除羟自由基时与Vc差别不大，而还原性实验则差异显著。这可能是因为提取物中具有强烈清除自由基的物质，但对还原性影响不大。　　四、用液相色谱电喷雾质谱测定不同保留时间对应的成分，确定了无花果叶中6种主要成分，分别为芹菜素-3-C-阿拉伯糖-6-C-葡萄糖苷、芹菜素芸香糖苷、芦丁、槲皮素六碳糖苷、山奈酚六碳糖苷、山奈酚芸香糖苷。其中芹菜素-3-C-阿拉伯糖-6-C-葡萄糖苷、芹菜素芸香糖苷、山奈酚六碳糖苷3种化合物为首次在无花果叶中发现。

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第一章 综述

1.1 前言

1.2 无花果的种质资源研究现状及主要栽培品种

1.3 无花果的营养成分

1.4 本课题研究的意义和目的

第二章 优化超声波提取无花果叶类黄酮工艺

2.1 材料与方法

2.2 结果与分析

2.3 结果与讨论

第三章 大孔吸附树脂吸附无花果叶黄酮的研究

3.1 材料与方法

3.2 结果与分析

3.3 结果与讨论

第四章 无花果叶片黄酮体外的抗氧化研究

4.1 材料与方法

4.2 结果与分析

4.3 结果与讨论

第五章 无花果叶黄酮类成分的色谱质谱研究

5.1 材料与方法

5.2 结果与分析

5.3 结果与讨论

参考文献

致谢