苯并(a)芘(Bap)对绒毛外滋养层细胞HTR-8/Svneo侵袭和迁移的影响及其机制探讨

摘要

目的：　　苯并(a)芘(BaP)作为持久性有机污染物，广泛存在于空气、水体中，对人体健康构成严重威胁。以往有研究表明苯并(a)芘(BaP)能够导致不良的妊娠结局，但机制尚不清楚。而成功的妊娠有赖于具有植入能力的胚泡和具有容受性的子宫内膜相互作用。其中绒毛外滋养层细胞对子宫内膜的适度侵袭是保证胚胎成功着床的重要因素。已有研究表明BaP能改变细胞的迁移和侵袭能力，促进肿瘤的发生和转移，而胚胎植入过程中滋养细胞对子宫内膜的侵袭过程在生物学行为上与肿瘤侵袭过程相似，但关于BaP是否影响正常滋养细胞功能，目前尚未见报道。因此本文探讨苯并(a)芘(BaP)对绒毛外滋养层细胞侵袭能力的影响以及可能的机制。　　方法：　　采用不同浓度的BaP作用于绒毛外滋养层细胞，应用MTT法、流式细胞术检测BaP对细胞活力及凋亡的影响，筛选出实验所需浓度。通过细胞侵袭和迁移实验观察BaP对绒毛外滋养层细胞的侵袭迁移能力的影响。检测在不同浓度下BaP对细胞迁移侵袭相关蛋白表达的影响。同时用Western blot检测与侵袭和迁移相关的信号通路的变化。　　结果：　　1 BaP下调绒毛外滋养层细胞HTR-8/SVneo的侵袭迁移能力，并呈现剂量依赖性。　　2在BaP的作用下，MMP-2、MMP-9、E-cadherin等基因表达上调，且E-cadherin表达呈现剂量依赖性。　　3 BaP作用下，MMP-2与MMP-9、E-cadherin表达的上调受MAPK信号通路而非PI3k/Akt信号通路调控。　　综上所述，BaP可影响绒毛外滋养层细胞HTR-8/SVneo的侵袭迁移能力，并且是由MAPK信号通路所介导的。

目录

声明

英汉缩略语名词对照

摘要

前言

1 材料

1．1 主要试剂

1．2 主要仪器

2 方法

2．1 细胞培养和BaP处理

2．2 MTT法检测细胞活力

2．3 细胞凋亡检测

2．4 Transwell小室检测细胞侵袭和迁移能力

2．5 Western blot检测侵袭和迁移信号通路相关蛋白表达

2．6 免疫荧光检测E-cadherin表达

3 结果

3．1 BaP对HTR-8／SVneo细胞活力及凋亡的影响

3．2 不同浓度BaP对HTR-8／SVneo细胞侵袭和迁移能力影响

3．3 BaP对HTR-8／SVneo细胞迁移和侵袭相关基因表达的影响

3．4 BaP对HTR-8／SVneo细胞迁移和侵袭能力改变相关通路检测

3．5 MAPK信号通路抑制剂对BaP诱导的相关信号通路蛋白的影响

3．6 MAPK信号通路抑制剂对BaP诱导的HTR-8／SVneo细胞迁移和侵袭能力的影响

3．7 MAPK信号通路抑制剂对BaP诱导的HTR-8／SVneo细胞迁移和侵袭相关蛋白表达的影响

4 讨论

全文小结

参考文献