雌激素受体GPR30在乳腺癌细胞生长中的作用

摘要

背景与目的: 雌激素参与调节大量的生物学过程，传统的雌激素效应是作为转录因子通过ERα，ERβ和雌激素受体相关蛋白γ发挥作用。不同于传统的雌激素核受体，新的雌激素膜受体GPR30则通过细胞内第二信使途径发挥效应，同时与抗雌激素表现出明显的亲和力。研究表明GPR30参与了细胞增殖、周期以及凋亡的调节。作为激素敏感组织之一，雌激素不仅促进乳腺的发育，而且刺激乳腺癌的生长。那么这一新的雌激素受体在乳腺癌中发挥什么作用呢？为此，本研究以乳腺癌细胞SKBR3为研究对象，以干扰GPR30的表达为手段，分析GPR30表达与肿瘤细胞生长的相关性。 方法: 运用siRNA干扰SKBR3细胞中GPR30的表达，给予17β-E2、EGF、SB202190干扰细胞生长，运用半定量RT-PCR检测各处理组GPR30 mRNA的表达水平，以MTT法检测干扰GPR30表达后细胞生长的变化。 结果: 1.成功构建了2个重组质粒pshRNAGPR301和pshRNAGPR302，并应用GenEscortTMⅠ成功转染至乳腺癌细胞株SKBR3，RT-PCR结果显示GPR30基因在mRNA水平被显著抑制，其表达率分别为正常细胞的64.25％和54.24％。 2.使用17β-E2、EGF、SB202190干扰细胞生长，1小时和24小时半定量RT-PCR检测GPR30表达，结果显示各组GPR30表达无差异；使用MTT检测细胞生长，结果显示：17β-E2对细胞生长无影响，EGF发挥了促生长作用，而SB202190抑制了细胞生长，且上述作用在抑制GPR30表达前后的细胞中无明显差异性。 结论: GPR30的表达与乳腺癌细胞生长之间未见明显相关性。

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文摘

英文文摘

论文说明：符号说明

声明

前言

第一部分GPR30shRNA表达载体的构建和鉴定

1材料与方法

2.结果

3.讨论

参考文献

第二部分雌激素受体GPR30对乳腺癌细胞生长的影响

1.材料与方法

2.结果

3.讨论

参考文献

全文总结

文献综述 GPR30，一种新的膜雌激素受体

致 谢

硕士期间发表的论文