两种植物多糖的分离纯化、结构鉴定及初步生物学活性的研究

摘要

本文以土人参和鸡矢藤为研究对象，材料经乙醇脱脂、热水浸提、Sevage法脱蛋白、乙醇沉淀等处理得粗多糖；粗多糖以DEAE－纤维素离子交换柱层析、SepharoseCL-6B凝胶柱层析等方法进行纯化得单一多糖成分；然后用凝胶柱层析和聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳鉴定纯度，凝胶渗透色谱(GPC)法测定分子量，气相色谱、红外光谱、紫外光谱、纸层析等技术初步分析了其结构；并对单一多糖成分的相关生物学活性进行了研究。最终从这两种植物中获得五种单一多糖成分,而这五种单一多糖成分及其相关活性，目前未见相关研究报道，具体研究结果如下。 从土人参中分离出两种单一多糖：TPP3a和TPP5b。TPP3a为酸性多糖，其糖含量为79.04％，糖醛酸含量为22.66％；数均分子量Mn为5.275×104，重均分子量Mw为1.076×105；由鼠李糖、阿拉伯糖和半乳糖组成，其摩尔比为：0.81:1.04:1.00；主要含有吡喃糖，糖苷键构型主要为β型。TPP5b为杂多糖，其糖含量为73.74％；数均分子量Mn为7.682×103，重均分子量Mw为8.452×103，由甘露糖和葡萄糖组成，其摩尔比为：1.00:4.50；主要含有呋喃糖。 采用诱导PC12细胞分化模型，以神经生长因子(NGF)为阳性对照，在20 μg/mL浓度下，TPP5b对PC12细胞的生长有一定的促分化作用，TPP3a无相关活性。 从鸡矢藤中分离出三种单一多糖：PSP2a、PSP2b和PSP3a。PSP2a为酸性多糖，其糖含量为69.12％，糖醛酸含量为3.62％；由阿拉伯糖、半乳糖和葡萄糖组成，其摩尔比为：1.00:0.92:1.41；主要含有呋喃糖。PSP2b为酸性多糖，其糖含量为85.33％，糖醛酸含量为7.38％；由阿拉伯糖、半乳糖和葡萄糖组成，其摩尔比为：1.00:0.73:1.80；主要含有呋喃糖。PSP3a为酸性多糖，其糖含量为64.43％，糖醛酸含量为25.57％，由鼠李糖、阿拉伯糖和半乳糖组成，其摩尔比为：1.23:1.00:0.55；主要含有吡喃糖，糖苷键构型主要为β型。 采用感染前腹腔给药方式，以链霉素为阳性对照，鸡矢藤粗多糖PSP(1000mg/kg/d)，鸡矢藤多糖组分PSP2(1000mg/kg/d)，鸡矢藤单一多糖成分PSP2a(500mg/kg/d)对受铜绿假单胞耐药菌感染的小鼠均有不同程度保护作用。小鼠存活率分别达到10％，30％，40％，以PSP2a的效果最好。多糖的活性因多糖纯度的提高而增强。