第一章 绪论
1.1 DHQ的化学结构与性质
1.2 DHQ的来源
1.2.1植物提取法
1.2.2化学合成法
1.2.3生物合成法
1.3 DHQ的生物学活性
1.3.1 DHQ对肝脏细胞的影响
1.3.2 DHQ对心肌细胞的影响
1.3.3 DHQ对淋巴细胞的影响
1.3.4 DHQ的抗炎抗氧化作用
1.3.5 DHQ的抗病毒活性
1.3.6 DHQ对多种细胞内酶的影响
1.3.7 DHQ的其他活性
1.4 DHQ的应用
1.4.1食品领域中的应用
1.4.2医药领域中的应用
1.4.3工业领域中的应用
1.5 DHQ的生物合成及关键基因
1.5.1 DHQ的生物合成途径
1.5.2 F3H基因
1.5.3 F3’H基因
1.6合成生物学在黄酮类化合物合成中的应用
1.6.1以E. coli为宿主合成黄酮类化合物
1.6.2以酿酒酵母为宿主合成黄酮类化合物
1.7研究目的及意义
第二章 F3H和F3’H的生物信息学分析
2.1实验材料
2.2实验方法
2.2.1黄酮3-羟化酶的生物信息学分析
2.2.2类黄酮3’-羟化酶的生物信息学分析
2.3结果与分析
2.3.1黄酮3-羟化酶的生物信息学分析结果
2.3.2类黄酮3’-羟化酶的生物信息学分析结果
2.4本章小结与讨论
第三章 合成DHQ原核基因工程菌株的构建
3.1实验材料
3.1.1菌株与质粒
3.1.2仪器与试剂
3.1.3主要溶液的配制
3.2实验方法
3.2.1基因的优化与合成
3.2.2 pETM6重组表达载体的构建
3.2.3大肠杆菌感受态细胞的制备
3.2.4转化及菌落PCR验证
3.2.5质粒提取及测序验证
3.2.6原核表达及产物鉴定
3.2.7不同诱导温度对二氢山奈酚合成的影响
3.3结果与分析
3.3.1 基因的人工合成
3.3.2重组表达载体的构建
3.3.3原核表达及活性鉴定
3.4本章小结与讨论
第四章 F3H蛋白的分离纯化及酶学性质研究
4.1实验材料
4.1.1菌株与质粒
4.1.2仪器与试剂
4.1.3主要溶液的配制
4.2实验方法
4.2.1 F3H基因的纯化重组表达载体的构建
4.2.2重组表达载体的诱导表达及蛋白纯化
4.2.3 F3H蛋白酶学性质分析
4.3结果与分析
4.3.1重组表达载体的构建
4.3.2重组载体的诱导表达及蛋白纯化
4.3.3 F3H蛋白酶学性质研究
4.4本章小结与讨论
第五章 合成DHQ酿酒酵母菌株的构建及优化
5.1实验材料
5.1.1菌株与质粒
5.1.2仪器与试剂
5.1.3主要溶液的配制
5.2实验方法
5.2.1基因的优化与合成
5.2.2单基因酵母工程菌的构建
5.2.3双基因共表达酵母工程菌构建
5.2.4酵母工程菌的诱导表达与产物测定
5.3结果与分析
5.3.1基因的优化与合成
5.3.2单基因酵母工程菌株的构建
5.3.3双基因共表达酵母工程菌的构建
5.3.4酵母工程菌的发酵
5.4本章小结与讨论
第六章 总结与展望
6.1结论
（1）F3H 与F3’H 的生物信息学分析
（2）合成DHQ 的原核工程菌的构建
（3）F3H 和F3’H 的蛋白纯化及酶学性质研究
（4）合成DHQ 的酿酒酵母工程菌的构建
6.2展望
参考文献
附录A
致谢
作者简历
中国农业科学院;
