GhTIE1调节TCPs的转录活性控制棉花和拟南芥分枝发育

目录

声明

主要符号对照表

第一章 绪论

1.1 植物分枝发育及调控

1.1.1 植物分枝生长调控的外在因素

1.1.2 植物分枝生长调控的内在因素

1.2 TB1基因对分枝调控作用的研究进展

1.3 TIE1的研究进展

1.4 棉花分枝调控研究进展

1.5 本课题研究的意义

第二章 材料与方法

2.1 实验材料

2.1.1 植物材料

2.1.2 菌株和质粒

2.1.3 主要试剂

2.1.4 培养基配方

2.1.5 实验仪器

2.2 实验方法

2.2.1 序列比对分析

2.2.2 棉花GhTIE1基因克隆

2.2.3 棉花GhTIE1基因过表达载体构建

2.2.4 农杆菌转化

2.2.5 拟南芥材料的培养以及农杆菌遗传转化实验

2.2.6 GhTIE1基因沉默载体的构建

2.2.7 棉花材料的培养以及VIGS干涉载体的注射实验

2.2.8 GhTIE1亚细胞定位实验

2.2.9 棉花遗传转化及转基因苗的阳性鉴定

2.2.10 酵母双杂互作实验

2.2.11 双分子荧光互补（BiFC）实验

2.2.12 GhTCPs基因互补拟南芥brc1-2突变体

2.2.13 GhTCPs调控GhHB21表达的分析

第三章 结果与分析

3.1 棉花GhTIE1及GhTCP序列生物信息学分析

3.1.1 棉花GhTIE1序列生物信息学分析

3.1.2 棉花GhTCPs序列生物信息学分析

3.2 GhTIE1及GhTCPs亚细胞定位分析

3.2.1 棉花GhTIE1亚细胞定位分析

3.2.2 棉花GhTCPs亚细胞定位分析

3.3 GhTIE1组织表达模式分析

3.4 GhTIE1在拟南芥中的功能验证

3.4.1 GhTIE1过表达载体的构建及农杆菌转化

3.4.2 GhTIE1转基因拟南芥阳性苗获得

3.4.3 GhTIE1转基因拟南芥表型分析

3.5 GhTIE1在棉花中的功能验证

3.5.1 T0代GhTIE1转基因棉花的获得及表型分析

3.5.2 GhTIE1的VIGS载体的构建及农杆菌转化

3.5.3 GhTIE1沉默后棉花分枝表型统计分析

3.6 GhTIE1与转录因子GhTCPs互作分析

3.6.1 酵母双杂实验结果分析

3.6.2 BiFC实验结果分析

3.7 GhTCPs恢复拟南芥brc1-2突变体表型

3.8 GhTIE1调控TCPs和HBs的表达

3.8.1 GhTIE1通过抑制GhTCPs活性降低GhHB21的转录

3.8.2 GhTIE1调控BRC1和HBs的转录

第四章 讨论

4.1 GhTIE1a和GhTIE1d在调节棉花和拟南芥分枝方面功能保守

4.2 GhTIE1作为转录阻遏物通过直接相互作用抑制GhTCPs活性

4.3 GhTIE1调节分枝发育依赖于HB21，HB40和HB53的表达水平

第五章 结论

5.1 GhTIE1a、GhTIE1d与AtTIE1的序列具有相同的保守结构域

5.2 过表达GhTIE1a和GhTIE1d促进棉花与拟南芥的分枝发育

5.3 棉花中GhTIE1沉默会严重降低侧枝数目

5.4 GhTIE1与GhBRC1、GhBRC2和GhTCP13互作并抑制其活性

5.5 HB21、HB40和HB53负调控棉花和拟南芥的分枝发育

5.6 创新点及展望

参考文献

附录A

致谢

作者简历