鸭疫里默氏菌2型制苗菌株的筛选及其高密度发酵条件优化的研究

摘要

鸭传染性浆膜炎是由鸭疫里默氏菌引起的危害雏鸭的一种急性或慢性败血性传染病。其中以鸭里默氏菌2型对我国养鸭场的所造成的危害最大。本研究通过对从山东、广西、四川等地分离的20株2型鸭疫里默氏菌分离株生理生化、药敏试验发现：这20株2型菌株分离株其生理生化特性一致；分离株表现不同程度的耐药性，而对头孢噻肟钠、氟苯尼考、绿都肠乐、罗红霉素、阿奇霉素和阿莫西林敏感度较高。 将20株分离菌株培养物分别接种15日龄健康雏鸭，每只颈部皮下注射1.0×10<'6>CFU/ml，观察10天。人工发病试验结果表明：20株分离菌株对15日龄雏鸭致病性差异较大，致死率从0/10到10/10不等，其中sd-5株致病性最强，致死率为10/10；其次分别为sd-4(致死率S/10)hy-2(致死率7/10)，由此可选择致病性较强的sd-5、sd-4、hy-2菌株作为制苗菌株的候选菌株． 通过对20株分离菌株制备的蜂胶疫苗免疫攻毒试验和ELISA抗体检测发现，以sd-5株制备的蜂胶疫苗，攻毒试验结果获得5/5保护，所产生ELISA抗体水平最高，由此筛选出sd-5株为制苗菌株。 以sd-5株为研究对象进行了高密度发酵试验，试验结果表明，发酵培养基的PH值是影响细菌生长的最为关键的因素，当PH值为7.8以上时，发酵菌数急剧降低，细菌增殖能力下降，当PH值为7.4时发酵能够达到较为理想的菌数(OD<,525nm>值)。通过应用正交试验设计(L3<'4>)对发酵条件进行优化，试验结果表明：温度为37.5℃，通气量为1.0L/S.L，转速200r/m，培养基PH值7.4，种子量为200ml(2.9％)为sd-5株增殖发酵的最佳条件，发酵18-20小时为最佳发酵时间。本研究为大批量高密度发酵生产高效鸭传染性浆膜炎疫苗抗原提供了科学依据。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略语表

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第一章引言

1.1研究目的和意义

1.2国内外研究现状

1.3研究内容和方法

第二章20株RA-2型分离株特性的研究

2.1材料与方法

2.2结果

2.3分析与讨论

第三章RA-2型制苗菌株的筛选

3.1材料与方法

3.2结果

3.3分析与讨论

第四章RA-2型高密度发酵条件优化的研究

4.1材料与方法

4.2结果

4.3分析与讨论

第五章结论

参考文献

致谢

附录

个人简历