氢醌对体外培养骨髓基质细胞核转录因子表达的影响

摘要

目的：1.进行骨髓基质细胞的体外传代培养，观测其生物学性能；2.研究氢醌对激活剂佛波酯(PMA)导致的骨髓基质细胞核转录因子表达的影响，并初步探讨基质细胞中NF-κB表达抑制在苯的血液学毒性中所起的作用。 方法：本实验为体外实验，分两部分完成，第一部分：骨髓基质细胞培养及其生物学特性观测。从志愿者抽取并分离得到骨髓基质细胞，进行体外细胞培养，动态观察细胞的形态学变化，流式细胞仪进行细胞计数和细胞周期检测，绘制细胞生长曲线；第二部分：将细胞转移入六孔培养板，调整每孔细胞密度为1.0×105/m1,氢醌用四种浓度水平0.1μM，1μM，10μM，100μM分别处理骨髓基质细胞并立即加入细胞激活剂PMA，每组设立空白对照，并用NF-κB抑制剂PDTC作阳性对照，台盼兰染色，比较各组细胞活力的变化，用台盼兰拒染率表示结果。细胞免疫组化，DAB染色后镜下观察氢醌未暴露和暴露后P65蛋白位置和活性的改变；然后分别在处理后0h.12h.24h.72h提取核蛋白，TransAMP65试剂盒测定NF-κB活性变化，结果用OD450表示。 结论：1.人类骨髓基质细胞能够在体外长期增殖，并表现出相似的生物学特性；2.氢醌对骨髓基质细胞的存活有影响，并且随氢醌浓度和作用时间而增1强。推测可能与核转录因子的激活抑制作用有关；3.佛波酯可引起骨髓基质细胞核转录因子激活，但这一作用可被HQ抑制；4.氢醌抑制核转录因子的作用与氢醌的浓度和作用时间相关，并且在一定浓度范围内可随时间而恢复。

目录

前 言

材料与方法

结 果

分析和讨论

结 论

参考文献

致 谢

综 述NF-kB研究进展