内毒素对体外培养人角膜基质细胞表达核转录因子NF-κB的影响

摘要

目的：探讨角膜基质细胞在内毒素作用下表达核转录因子ＮＦκＢ的情况。方法：取体外培养的２～３代人角膜基质细胞，分别加入０．２、１．０、５．０、２５ｍｇ·Ｌ－１内毒素培养６ｈ；１．０ｍｇ·Ｌ－１内毒素培养１．５、３、６、１２、２４ｈ，采用免疫荧光抗体染色，流式细胞仪计数的检测方法，观察ＮＦκＢ的表达水平。细胞爬片经免疫荧光染色后摄像。结果：角膜基质细胞ＮＦκＢ的基础表达率为９．４％。内毒素作用后，随时间和浓度递增，于６ｈ和药物质量浓度为５ｍｇ·Ｌ－１时最高，阳性率分别为２１．７％和４８．０％，其后下降。用药前，核转录因子分布于细胞浆内。内毒素作用后，细胞浆内ＮＦκＢ增多，核内也出现阳性表达。结论：核转录因子ＮＦκＢ存在于体外培养的人角膜基质细胞中，能够被内毒素激活。