MN/CA9和Ep-cam基因检测在良恶性胸腔积鉴别中的价值

摘要

目的： 胸腔积液(pleuraleffusion)是临床上常见的征象，许多疾病可伴有胸腔积液。由于良性胸腔积液和恶性胸腔积液(malignantpleuraleffusion，MPE)的治疗和预后截然不同，故对两者进行鉴别具有重要的意义。由于胸腔积液中癌细胞数量少或与炎性细胞及反应性间皮细胞相似，常规的细胞学检查难以判断。本文采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测MN/CA9和Ep-cam基因在良恶性胸腔积液中的表达，评价其对良恶性胸腔积液鉴别诊断的价值，为临床应用提供实验依据。 方法： 选择2007年6月至2008年1月期间在我院呼吸内科住院的65例“胸腔积液”患者，经胸水脱落细胞、胸膜活检、CT定位下穿刺、纤维支气管镜、胸腔镜检查病理确诊的35例MPE为恶性组，余30例良性胸腔积液为良性组。抽取患者的胸水和血液标本，胸水经离心取沉淀细胞，以hGAPDH作参照，采用SYBRGreenⅠ实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQRT-PCR)检测胸水沉淀细胞中MN/CA9mRNA、Ep-cammRNA的表达情况，病理学家找胸水脱落细胞，免疫化学发光法检测胸水和血癌胚抗原(carcinoembryonicantigen，CEA)水平。凡符合下列之一：①胸水中MN/CA9mRNA表达阳性；②胸水中Ep-cammRNA表达阳性；③胸水找到癌细胞；④胸水CEA大于5ng/ml；⑤血CEA大于5ng/ml；本实验则诊断为MPE。MN/CA9和Ep-cam表达结果分别与胸水脱落细胞学检查、胸水癌胚抗原(pCEA)和血癌胚抗原(sCEA)检测结果进行比较。 结果： 35例MPE中MN/CA9基因有29例表达(其中肺癌20/23，其他肿瘤9/12)，Ep-cam基因表达有31例表达(其中肺癌21/23，其它肿瘤10/12)，良性胸腔积液中各有1例表达，MN/CA9和Ep-cam基因在良恶性胸腔积液中的表达有明显差异(x2值分别为41.4、47.0，P值均＜0.01)。MN/CA9和Ep-cam诊断MPE的敏感性(SN)分别为82.6％、88.6％，特异性(SP)分别为96.7％、96.7％，阳性预计值(PPV)分别为96.7％、96.9％，阴性预计值(NPV)分别为82.9％、87.9％；胸腔积液细胞学、胸水癌胚抗原、血癌胚抗原诊断MPE的SN分别为62.9％、65.7％、57.1％，SP分别为100％、96.7％、96.7％。对MPE的诊断，采用FQRT-PCR方法检测MN/CA9mRNA的SN高于其他三项检查，差异具有统计学意义(P值均＜0.05)，而SP无统计学差异(P值均＞0.05)；采用FQRT-PCR方法检测Ep-cammRNA的SN也高于其他三项检查，差异具有统计学意义(P值均＜0.05)，而SP无统计学差异(P值均＞0.05)。细胞学阴性的13例MPE中，MN/CA9有7例表达，SN为55.6％，SP为100％；Ep-cam有8例表达，SN为61.5％，SP为100％；两者联合检测的细胞学阴性MPE的SN为76.9％，SP为100％。 结论： MN/CA9和Ep-cam基因有望成为MPE中癌细胞的分子标志物；采用SYBRGreenⅠFQRT-PCR检测MN/CA9和Ep-cammRNA可有助于MPE的诊断。联合检测胸腔积液中MN/CA9和Ep-cam基因的表达可能有助于提高细胞学阴性恶性胸腔积液中的诊断敏感性。

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综述 MN/CA9和Ep-cam与肿瘤相关研究的进展