PCA3基因启动子多态性与前列腺癌易患性关系的初步研究

摘要

目的: 本研究的目的在于探讨前列腺癌患者PCA3基因的启动子是否存在多态性，以及其与前列腺癌的发生是否存在相关性。 方法: 1、以本院2006年6月-2007年4月门诊或住院病例为研究对象。PCa组42例，年龄43～86岁，平均(69.40±10.37)岁；良性BPH组30例，年龄43～82岁，平均(69.34±10.30)岁。病例选择标准为：经病理学检查确诊患者。所有受试对象均知情同意，本研究经医院医学伦理委员会同意批准。 2、根据PCA3基因DNA全序列(GenbankAL359314)采用PrimerPremier5.0软件在启动子相邻区域设计引物，提取前列腺癌患者与前列腺肥大患者血中单个核细胞的DNA，对其PCA3基因的启动子采用多聚酶链式反应扩增目的片段后进行测序分析。 3、由于在本次实验中，发现患者PCA3基因的启动子存在插入缺失性改变，同一患者可同时存在不同插入缺失性改变的双链致造成测序结果出现大规模重叠峰。对于这类标本，扩增目的片段后导入pBS-T载体进行克隆测序加以验证。对检测到的不同型别的启动子进行合理的归类，分析其与前列腺癌的发生之间是否存在一定的联系。 结果: 1、在前列腺肥大患者和前列腺癌患者中除了检测出与Genbank公布的PCA3基因启动子一致的序列外，另外检测到7种因插入缺失性改变引起的启动子基因多态性序列，其与Genebank公布的PCA3启动子序列(AF279290)的主要差异在于启动子的253-285bp左右CAAA和TAAA重复次数的改变。为方便描述，我们以CnTm对这些链进行命名，其中Cn代表在该位置CAAA序列重复了n次，Tm代表TAAA序列重复了m次，可以把检测到的PCA3基因多态性分为C4T5、C3T5、C3T4、C2T5、C2T6、C2T3、C2T7、C1T88种类型。 2、根据患者PCA3基因启动子多态性的不同，可分为12种组合类型(详见文中表4与表5)，其中最多见的三种类型(C3T5+C3T5:C3T5+C2T5:C3T5+C2T6，详见文中表6)在前列腺癌患者和前列腺肥大患者中检出的数量分别为(Pca=2:11:12;BPH=8:13:4)，差异存在显著性意义(x2=7.77，P=0.021)，表现出随TAAA重复次数增加而前列腺癌发生增加的现象。其它组出现类似现象，但限于例数过少，有待于增加例数后予以统计。 结论: PCA3基因的启动子存在短片段重复序列多态性(shorttandemrepeat，STR)改变，重复的TAAA序列可能隐含了非典型的TATA框作为启动子上转录识别的位点，这种改变与前列腺癌的发生存在一定的关联。

目录

文摘

英文文摘

声明

引言

材料与方法

结果

分析与讨论

小结

参考文献

附录1:PCA3启动子的引物的BLAST的部分结果

附录2:测序片段与PCA3启动子序列(AF279290)的比对结果

附录3:实验中检测到的各种类型的PCA3启动子基因(测序图)

附录4:前列腺癌特异性PCA3基因启动子基因多态性测序结果及相应的克隆测序(示启动子207-310bp左右序列),见图1-12

附录5:PCA3基因启动子多态性(数据)

附录6:PCA3基因启动子多态性(图)

附录7:缩略词表

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致谢

综述 雄激素非依赖性前列腺癌细胞发生机制研究