果蝇E3泛素连接酶基因CG11414和鸟苷酸激酶基因CG11811敲除及功能分析

摘要

目的：本研究以黑腹果蝇为模式生物，对CG11414和CG11811基因进行功能缺失和过表达的分析，来研究这两个基因在果蝇发育过程中的作用。 方法：首先，我们通过P因子敲除的方法获得了CG11414缺陷型果蝇和CG11811缺陷型果蝇。其次，我们构建了CG11414-pUAST-V5和CG11811-pUAST-V5重组子，通过转染Hela绌胞确定这两个基因在Hela细胞中的亚细胞定位。最后，通过细胞克隆和过表达的实验方法研究这两个基因对Wnt，Hh，Dpp信号通路的影响。 结果：获得3株CG11414缺陷型果蝇，均为纯合半致死，获得2株CG11811缺陷型果蝇，均为纯合致死。转染Hela细胞后，确定CG11414定位于绌胞质，CG11811定位于线粒体。通过细胞克隆和过表达实验发现这两个基因的功能缺失和过表达对Wg、Hh、Dpp信号通路没有影响，但是在眼睛中过表达CG11414基因会导致成虫果蝇眼睛产生缺陷。 结论：本研究首次获得了CG11414和CG11811缺陷型果蝇，并初步探索了这两个基因的功能，猜测CG11414可能是一个E3泛素连接酶，并能够影响果蝇眼睛的发育。猜测CG11811可能是一个鸟苷酸激酶，并在ATP依赖的氧化磷酸化中发挥作用。