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Clathrin Heavy Chain 1在绵羊卵母细胞减数分裂成熟及早期胚胎发育过程中的作用

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第一章 文献综述卵母细胞减数分裂纺锤体组装机制的研究进展

1卵母细胞减数分裂纺锤体微管起源

1.1 RanGTP途径

1.2 CPC途径

1.3 Augmin途径

1.4 其他成核途径

2卵母细胞减数分裂纺锤体微管组装

2.1纺锤体微管构成

2.2纺锤体双极化

2.3纺锤体极的形成

3 局部mRNA的翻译在纺锤体形成中的作用

4 展望

第二章 实验研究Clathrin Heavy Chain 1在绵羊卵母细胞减数分裂成熟及早期胚胎发育过程中的作用

1引言

2实验材料

2.1实验动物

2.2主要药品与试剂

2.3抗体

2.4主要仪器设备

2.5主要实验耗材

3实验方法

3.1绵羊卵母细胞的采集

3.2绵羊卵丘细胞的去除

3.3绵羊卵母细胞的孤雌激活

3.4早期胚胎的培养

3.5药物处理

3.6 冷处理(cold treatment)

3.7 CLTC morpholino(MO)显微注射

3.8免疫荧光染色

3.9免疫印迹(Western Blot)

3.10数据统计分析

4结果

4.1 CLTC在绵羊卵母细胞减数分裂成熟和早期胚胎发育过程的表达与定位

4.2使用药物破坏纺锤体结构后CLTC的定位和表达

4.3 冷处理后和恢复后CLTC的表达和定位

4.4 CLTC的敲减对绵羊卵母细胞减数分裂的影响

4.5 CLTC MO敲减干扰了绵羊早期胚胎发育

5讨论

6结论

参考文献

附录

致谢

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