补中益气汤对力竭心身应激大、小鼠胃窦ICC的影响研究

摘要

目的 本课题研究以胃肠动力的起搏细胞—Cajal间质细胞(Interstitial Cells ofCajal，ICC)作为切入点，建立力竭应激“劳倦伤脾”动物模型，围绕ICC的结构、功能等变化，从在体观察、胃肠动力实验、细胞超微形态学观察、基因表达检测等不同层次水平，探讨胃肠道功能紊乱性疾病的发病机制，研究补中益气汤对胃肠道功能紊乱性疾病的治疗作用以及作用机制。 同时，从文献计量学的角度，对补中益气汤进行学术动态情报学研究，探索这一经典名方的研究发展趋势。实验研究与文献研究相结合，力求把对补中益气汤的研究推向更广泛、更深入、更全面的层次，为该方的临床应用及科研探索提供部分实验数据，为临床治疗胃肠功能紊乱性疾病提供新的策略参考和药物干预作用的靶点依据。 方法 （一）实验研究 应用负重力竭游泳的造模方法，模拟力竭应激“劳倦伤脾”大、小鼠模型，并从不同造模时程对比观察各组动物一般情况，体重变化，抗疲劳能力等在体指标;利用胃排空、肠推进实验观察其胃肠动力改变;大鼠胃窦部取材，利用实时荧光定量PCR(Real-Time qPCR)法，检测c-kit目标基因表达量变化;使用透射电子显微镜观察ICC超微结构改变。 （二）文献研究 选用“维普中文科技期刊数据库”为资料主要来源，采用布拉德福文献离散律计量分析研究法，以1989～2013年期间研究补中益气汤的文献为研究对象，对文献年代，期刊分布，文献类型，疾病研究，药理实验等5个方面分别进行统计分析，以求定量描述，进而揭示其分布特点，探索这一经典名方的研究发展趋势，并对存在问题提出建议，从而有助于今后对补中益气汤更进一步的深入研究。 结果 （二）实验研究 本实验成功模拟了力竭应激“劳倦伤脾”大、小鼠模型，研究发现模型组动物一般情况呈现脾虚证表现，体重增长缓慢，抗疲劳能力下降，胃肠动力紊乱，补中益气汤能改善以上劳倦应激损伤所导致的改变。模型组大鼠胃窦部c-kit基因表达量随着造模时程的延长，表现出从应激性上调逐渐向损伤性下调的改变趋势;补中益气汤组整体呈现恢复性调节至趋近于正常的表达趋势。模型组大鼠出现了电镜下ICC超微结构的损伤，应用补中益气汤能有效控制和减轻ICC的损伤。 （二）文献研究 归纳分析25年来研究补中益气汤的文献可知，其文献数量当前及预测的情况均整体呈现逐年递增的热点研究趋势。文献期刊分布统计分析显示载文期刊相对集中，文献分散度不大，已形成对该方研究文献的主要载体期刊群。文献类型分布以临床应用研究的文献占主导地位，治疗疾病分科以内科疾病为主，病种综合分类以研究治疗便秘、内脏下垂和发热为最多。药理实验研究及综述类文献却相对较少，热点是对脾胃肠功能的调节和对免疫功能的调节。 结论 （一）实验研究 补中益气汤能调节脾胃肠功能，对胃肠功能紊乱具有调节和治疗作用。该方可能通过调节c-kit mRNA的表达量，进而调节胃肠功能的紊乱，推测这可能是补中益气汤治疗胃肠动力紊乱性疾病的机制之一。ICC超微结构的改变与胃肠功能紊乱性疾病之间有着紧密的联系，补中益气汤可在一定程度上改善这些异常变化，推测可能是其治疗胃肠动力性疾病的另一重要机制。 （二）文献研究 综合分析可知，现今补中益气汤临床应用以治疗胃肠疾病为主，药理实验中也以研究其调节脾胃肠功能的作用为主，而研究其调节应激反应的实验研究却相对较少。而在当今社会由劳倦、应激所导致的心身疾病患病率逐年上升，由此引发腹胀、腹泻等胃肠功能紊乱的消化系心身疾病占据很大比例。胃肠功能紊乱性疾病与心身应激反应存在较紧密的联系，因此开展针对补中益气汤干预心身应激反应致胃肠功能紊乱性疾病的药理作用及作用机制等研究显得尤为必要。对该方进一步的研究可以从以下几方面着手:一是加强基础研究。二是加强补中益气汤的药理实验研究。三是运用多学科知识，吸收当代自然科学、现代医学等学科的新知识、新技术，融合新理论、新观点进行研究。四是文献、临床、实验、开发相结合。

目录

声明

摘要

中英文缩略词对照表

引言

第一章 实验研究部分

第一节 补中益气汤对力竭心身应激小鼠作用的研究

提要

一、实验材料

二、实验方法及观测指标

三、实验结果

四、讨论

五、结论

参考文献

第二节 补中益气汤对力竭心身应激大鼠作用的研究

提要

一、实验材料

二、实验方法及观测指标

三、实验结果

四、讨论

五、结论

参考文献

第三节 实时荧光定量PCR法检测补中益气汤对力竭心身应激大鼠胃窦ICC c-kit mRNA表达量的影响

提要

一、实验材料

二、实验方法及观察指标

三、实验结果

四、讨论

五、结论

参考文献

第四节 补中益气汤对力竭心身应激大鼠胃窦ICC超微结构的影响

提要

一、实验材料

二、实验方法及观察指标

三、实验结果

四、讨论

五、结论

参考文献

第五节 总结和展望

一、总结

二、展望

第二章 文献研究部分——补中益气汤的文献计量学研究

第一节 资料与方法

一、资料来源

二、研究方法

第二节 结果与分析

一、文献年代分布

二、文献量与年度相关性分析及发展趋势预测

三、文献期刊分布

四、文献类型分布

五、文献对病症研究的分布

六、药理实验分布

第三节 结语和展望

一、讨论和结语

二、展望

参考文献

第三章 文献综述

第一节 补中益气汤源流及现代研究进展

第二节 力竭游泳运动心身应激分析

第三节 胃肠道Cajal间质细胞研究进展

第四节 结语和展望

参考文献

部分实验照片

攻读硕士研究生期间学习工作情况

致谢