丽江海棠果的化学成分及抗氧化活性研究

摘要

丽江海棠果,原名丽江山荆子(Malus rockii Rehd)是来自蔷薇科苹果属丽江山荆子的果实。该果实在当地深受居民喜爱,它肉质细脆、多汁、酸甜可口。纳西族用它入药,它具有利尿、帮助消化、延缓衰老、治疗小儿肾炎、糖尿病等药效。
　　本论文应用体外抗氧化活性测试方法,对海棠果中的抗氧化活性成分进行研究。
　　首先,将海棠果粗提物分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取,得到不同极性萃取物;通过清除DPPH自由基法、ABTS自由基法、羟自由基法以及超氧自由基法对海棠果不同极性部位进行了抗氧化活性测定,其结果显示正丁醇相清除DPPH自由基与超氧自由基的效果最好,他们的EC50分别达到0.405±0.035 mg/mL、0.462±0.024 mg/mL;对清除ABTS自由基与羟自由基,乙酸乙酯相效果最好,其EC50分别为0.289±0.019 mg/mL、0.361±0.089 mg/mL。但是由于乙酸乙酯相提取率极低,正丁醇提取率高,所以选择对正丁醇相进行下一步化学成分分离。
　　然后,通过正向硅胶柱将正丁醇相进一步划段,划分为6段,接着对这6段进行抗氧化活性实验;结果显示第1、2段在1 mg/mL时清除DPPH自由基与ABTS自由基都达到90％以上,且EC50值也是最高的,二者差异不显著(P>0.05)。
　　最后,应用正相硅胶、葡聚糖凝胶(LH-20)、高效液相(HPLC)等色谱分离技术和现代波谱学技术(NMR,MS),最终从中分离鉴定了11个化合物,他们分别为:表儿茶素(01)、柚苷二氢查尔酮(02)广寄生苷(03)、1-O-香豆素-β-D-葡萄糖(04)、α-D-塔罗糖(05)、根皮苷(06)、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(07)、齐墩果酸(08)、蔷薇酸(09)、五灵腊三萜酸(10)、β-胡萝卜苷(11)。对分离得到的11个化合物也进行抗氧化活性测试,结果发现化合物01-07(除05)都具有很好的抗氧化活性,其中化合物01的抗氧化活性最好,它的EC50值为0.124±0.009 mg/mL,与阳性对照差异不显著(P>0.05)。化合物01-07都是从正丁醇相中的第1、2段中分离得到。可以证明这些单体化合物是使海棠果具有强抗氧化活性主要原因。
　　另外,我们还测定了丽江海棠果氨基酸的含量,果实中天冬氨酸含量最高,达到107.38 mg/100 g;它还含有丰富的人体必须氨基酸,如亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸。
　　以上的研究为海棠果开发成保健食品奠定良好的理论基础。

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1 引言

1.1 丽江海棠果简介

1.2 海棠果的化学成分和生物活性研究进展

1.3 抗氧化活性简介

1.4 研究目的与意义

1.5 研究内容与目标

2 材料与方法

2.1 丽江海棠果的来源

2.2 化学成分提取、分离与鉴定

2.3 抗氧化活性研究

2.4 氨基酸含量的测定

2.5 统计方法

3 结果与分析

3.1 化学成分分离与鉴定

3.2 抗氧化活性结果与分析

3.3 氨基酸的组成与含量

4 讨论

4.1 海棠果化学成分讨论

4.2 海棠果生物活性讨论

5 创新点

6 结论

参考文献

附录

致谢