昆明犬繁殖性能和成纤维细胞系生物学特征的研究

摘要

昆明犬作为我国独放立自主培育的唯一一个工作犬品种,在国际国内都得到广泛的推广与应用。目前常规繁育方法培育效率及其低下,若利用体细胞克隆技术则可以对优秀警犬进行大规模繁殖,本文对影响克隆昆明犬的一些因素进行前期研究。对昆明犬繁殖性能进行初步研究,发现昆明犬在一年四季均有发情,其中9月份发情比例最高,4月份发情比例最低,气温对发情影响不大。全年各月均有母犬分娩,统计767只昆明犬母犬的发情、配种、繁殖相关记录,配种率是89.2％,妊娠率为62.6%,昆明犬的平均妊娠期为61.6天,母犬平均窝产仔数为7只左右,窝产活仔数为6.7只左右。以1～2岁的昆明犬母犬和马里努阿犬母犬作为试验对象,采用PMSG+HCG组合诱导同期发情,证明连用5次PMSG500IU/只/次;HCG500IU/只在10th天,这种处理方法可有效诱导母犬发情。处理组所有母犬进入发情期,发情率达100%。对照组不注射任何外源激素,在整个试验过程中不表现任何发情症状。对Ⅳ组5只和Ⅴ组中3只昆明犬母犬表现发情后进行配种,利用B超对实验母犬进行妊娠检查。结果Ⅳ组受胎率为20%(1/5),Ⅴ组受胎率33.33%(1/3)。以新生昆明犬耳缘组织和妊娠33d的昆明犬胎儿组织为材料,成功构建了2个耳成纤维细胞系和12个胎儿成纤维细胞系,获得的细胞系呈典型的成纤维细胞特征,能作为克隆研究中所需供核细胞的来源,并鉴定了昆明犬胎儿性别。对母犬生殖器官解剖显示,犬的殖生理结构特殊,性卵巢被卵巢囊包裹,弯曲而短小的输卵管行走于卵巢囊壁内。该研究对进一步开展昆明犬的体细胞克隆研究奠定了基础。

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1 引言

1.1中国昆明犬

1.2传统昆明犬育种

1.3体细胞克隆技术在昆明犬繁育方面的应用

1.4影响犬体细胞克隆的因素

1.5本研究的目的意义

2实验部分

2.1实验1.昆明犬母犬生殖生理特性的研究

2.2实验2.外源激素诱导工作犬同期发情实验

2.3实验3.昆明犬成纤维细胞生物学特性的研究

3 结论

参考文献

致谢