人脂肪来源的间充质干细胞对顺铂介导的上皮性卵巢癌细胞凋亡作用的影响

摘要

目的：
　　细胞水平上研究人脂肪来源的间充质干细胞（AD-MSCs，Adipose-derived mesenchymal stem cells）影响顺铂介导的上皮性卵巢癌细胞的凋亡作用及其作用机制。
　　材料和方法：
　　1.原代培养AD-MSCs，留取2-3天培养基上清作为条件培养基。条件培养基培养10天后的上皮性卵巢癌细胞SKOV3和ES2作为实验组进行后续检测，常规培养基中的肿瘤细胞作为对照组。
　　2. MTT法检测顺铂对AD-MSCs处理前后的上皮性卵巢癌细胞SKOV3和ES2的毒性变化，计算IC50值。
　　3.分别用 Hoechst33342荧光染色法、Annexin V-FITC流式细胞术、Western Blotting检测经一定浓度顺铂作用48h后的卵巢癌细胞SKOV3和ES2中凋亡小体、凋亡率以及活化的caspase-3片段的表达来研究AD-MSCs对顺铂介导的上皮性卵巢癌细胞的凋亡作用。
　　4.原子光谱吸收法检测经AD-MSCs处理前后的上皮性卵巢癌细胞SKOV3和ES2内铂蓄积的变化。
　　结果：
　　1. MTT实验中，经AD-MSCs刺激后的上皮性卵巢癌细胞对顺铂的敏感性降低。实验组中 ES2和 SKOV3的IC50值从对照组的14.82±0.98μmo l/L和29.06±4.29μmol/L分别增加至23.70±0.97μmol/L（PES2=0.004）和49.80±4.51μmol/L（PSkov3=0.002）。
　　2.经顺铂作用后的实验组卵巢癌细胞中，Hoec hs t33342荧光染色法结果显示凋亡小体的形成少于对照组；Anne xin V-FITC流式细胞术中测定的ES2和SKOV3细胞凋亡率较对照组下降1.9倍（P=0.019）和2.33倍（P=0.04），且以早期凋亡为主；Western blotting结果显示caspase-3活化片段的的表达少于对照组。AD-MSCs条件培养基可以增强卵巢癌细胞对顺铂的凋亡抗性。
　　3.原子光谱吸收法中，经AD-MSCs刺激后的上皮性卵巢癌细胞ES2和SKOV3中铂的蓄积从对照组的94.29±19.61μg/g和111.69±23.10μg/g降至30.99±9.64μg/g和40.24±16.93μg/g（PES2=0.002，PSkov3=0.004）。
　　结论：
　　AD-MSCs的旁分泌作用可以增加卵巢癌细胞的凋亡抗性，减少卵巢癌细胞内Pt的蓄积，增强顺铂耐药作用。

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中英文缩略词表

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引言

材料和方法

一、 实验材料

二、 实验方法

结果

一、 AD-MSCs条件培养基可以降低卵巢癌细胞对顺铂的敏感性。

二、 AD-MSCs条件培养基可以增强卵巢癌细胞对顺铂的凋亡抗性。

三、 AD-MSCs条件培养基可以减少卵巢癌细胞中铂的蓄积。

讨论

参考文献

综述: 间充质干细胞和肿瘤微环境的相互作用

致谢