脂肪间充质干细胞来源外泌体对缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡的影响

摘要

目的研究小鼠脂肪间充质干细胞(mASCs)来源外泌体(Exo)对新生小鼠心肌细胞缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞凋亡的影响。方法采用超高速离心法分离提取mASCs来源Exo(mASCs-Exo),透射电子显微镜(TEM)、纳米颗粒示踪分析技术(NTA)和蛋白质免疫印迹法(WB)观察并鉴定Exo;差速贴壁法提取C57BL/6乳鼠心肌细胞,免疫荧光检测心肌标志蛋白CTnI和conexin43表达;PKH-26标记Exo示心肌细胞摄取能力;实验分为3组:正常对照组(control组)、缺氧/复氧组(H/R组)和缺氧/复氧+mASCs-Exo组(H/R+mASCs-Exo组);TUNEL染色检测心肌细胞凋亡;WB检测凋亡相关蛋白表达水平。结果与control组比较,H/R组心肌细胞凋亡率升高(P<0.01),与H/R组比较,H/R+mASCs-Exo组心肌细胞凋亡率降低(P<0.05);与control组比较,H/R组p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、Bcl-2/Bax比值降低(P<0.01),而cleaved caspase-9/caspase-9比值升高(P<0.001);与H/R组比较,H/R+mASCs-Exo组p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、Bcl-2/Bax比值升高(P<0.05或P<0.01),cleaved caspase-9/caspase-9的比值降低(P<0.01)。结论mASCs-Exo可抑制H/R诱导心肌细胞凋亡,这可能通过激活PI3K/Akt信号通路介导的。