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黄芪药渣中阿拉伯木聚糖及其降解寡糖的抗肿瘤活性研究

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目录

符号、缩略词术语注释表

第一章 引言

1.1 立题背景及意义

1.2 研究内容、技术流程图及创新点

1.2.1 研究内容

1.2.2技术路线图

1.2.3 创新点

第二章 文献综述

2.1 中药渣的利用现状

2.2 中药渣多糖研究概况

2.3 中药多糖抗肿瘤的作用机理

2.3.1 直接抑制或杀死肿瘤细胞

2.3.2 调节机体免疫力来抗肿瘤

2.3.3 增效减毒的作用

2.4 寡糖的研究

2.4.1 寡糖的制备

2.4.2 寡糖结构分析

2.4.3 寡糖的生物活性

第三章 黄芪药渣中不同种类阿拉伯木聚糖的体外抗肿瘤作用研究

3.1 引言

3.2 材料和仪器

3.2.3 仪器

3.3 实验方法

3.3.1 细胞株培养及传代

3.3.2 MTT法筛选活性多糖

3.3.3 活性多糖AX-I-3对人肺腺癌A549细胞迁移能力的影响

3.3.4 流式细胞术检测AX-I-3处理的A549细胞周期分布及凋亡率

3.3.5 qRT-PCR检测A549细胞中凋亡相关基因mRNA的表达

3.3.6 Western blot测定A549细胞中凋亡相关蛋白的表达

3.3.7 数据处理及统计分析

3.4 实验结果

3.4.1 黄芪药渣中不同种类阿拉伯木聚糖对人肺腺癌A549细胞增殖的抑制作用

3.4.2 活性多糖AX-I-3对人肺腺癌A549细胞迁移能力的影响

3.4.3 流式细胞仪检测AX-I-3对人肺腺癌A549细胞周期的影响

3.4.4 FITC-Annexin V/PI 双染色法检测AX-I-3对人肺腺癌A549细胞凋亡率的影响

3.4.5 AX-I-3对A549细胞中凋亡相关基因P53、Bax、Bcl-2、Cyt-C及Caspase-3 mRNA表达的影响

3.4.6 AX-I-3对A549细胞中凋亡相关蛋白P53、Bax、Bcl-2、Cyt-C及Caspase-3表达的影响

3.5 小结

第四章 黄芪药渣阿拉伯木聚糖AX-I-3的体内抗肿瘤作用研究

4.1 引言

4.2 材料和仪器

4.2.1材料

4.2.2 试剂及细胞株

4.2.3 仪器

4.3 实验方法

4.3.1 实验动物及分组

4.3.2 造模和给药剂量

4.3.3 抑瘤率和脏器指数

4.3.4 肿瘤组织病理切片1) 取材、脱水浸蜡及包埋

4.3.5 血清细胞因子TNF-α、IL-2和IL-6的检测

4.3.6 脾脏T淋巴细胞检测

4.3.7 肿瘤组织中凋亡相关蛋白检测

4.3.8 数据处理及统计学分析

4.4 实验结果

4.4.1 药渣阿拉伯木聚糖AX-I-3对Lewis肺癌小鼠移植瘤生长和免疫器官指数的影响

4.4.2 HE染色观察AX-I-3对肿瘤组织形态学改变的影响

4.4.3 AX-I-3对小鼠血清中IL-2、IL-6和TNF-α的影响

4.4.4 AX-I-3对小鼠脾脏T淋巴细胞CD3+、CD4+、CD8+的影响

4.4.5 AX-I-3对肿瘤组织中P53、Bax、Bcl-2、Cyt-C及Caspase-3蛋白表达影响

4.5 小结

第五章 阿拉伯木聚糖AX-I-3降解寡糖的制备、结构分析及抗肿瘤活性研究

5.1 引言

5.2 材料和仪器

5.2.3 仪器

5.3 实验方法

5.3.1 酶法降解条件

5.3.2 酸法降解条件

5.3.3 降解产物重复性和稳定性考察

5.3.4 不同分子量寡糖的制备

5.3.5 不同分子量寡糖的结构分析

5.3.6 不同分子量寡糖对人肺腺癌A549细胞的抑制作用

5.3.7 活性寡糖OS-3对A549细胞周期及凋亡率的影响

5.3.8 A549细胞中凋亡相关mRNA表达的检测

5.3.9 A549细胞中凋亡相关蛋白表达的检测

5.3.10 数据处理及统计分析

5.4实验结果

5.4.1 酶法降解结果

5.4.2 酸法降解结果

5.4.3 降解产物重复性和稳定性考察结果

5.4.4 不同分子量寡糖的制备

5.4.5 不同分子量寡糖结构分析结果

5.4.6 不同分子量寡糖对人肺腺癌A549细胞抑制作用结果

5.4.7 流式细胞仪检测活性寡糖OS-3对A549细胞周期的影响

5.4.8 FITC-Annexin V/PI 双染色法检测活性寡糖OS-3对A549细胞凋亡率的影响

5.4.9 活性寡糖OS-3对A549细胞中凋亡相关基因mRNA表达的影响

5.4.10 活性寡糖OS-3 对A549 细胞中凋亡相关蛋白表达的影响

5.5 小结

第六章 总结与展望

6.1 研究工作总结

6.2 展望

6.3 学习心得

参考文献

攻读学位期间取得的研究成果

致谢

个人简况及联系方式

承 诺 书

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