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LincRNA-p21通过抑制谷氨酰胺酶的表达抑制谷氨酰胺代谢及膀胱癌细胞增殖的机制研究

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1、引言

2、材料与方法

2.1细胞培养

2.2.1 实验主要试剂、耗材

2.2.2主要实验仪器、设备

2.3主要实验方法

2.3.1 膀胱癌组织标本和膀胱癌细胞系中总RNA的提取步骤

2.3.2 RNA--cDNA

2.3.3 qRT-PCR技术检测表达水平

2.3.4 细胞培养

2.3.5 siRNA设计合成及慢病毒载体构建

2.3.6 质粒扩增提取

2.3.7 稳转株构建

2.3.8 细胞增殖实验

2.3.9Western Blot(WB)

2.3.10谷氨酰胺酶抑制剂(BPTES)处理及细胞活力分析

2.3.11代谢物测量

2.3.12统计分析

3、结果

3.1 膀胱癌组织中LincRNA-p21表达降低,谷氨酰胺酶表达水平升高

3.2 在膀胱癌细胞中过表达或沉默LincRNA-p21

3.3 LincRNA-p21在膀胱癌细胞中的生物学功能

3.4 LincRNA-p21抑制谷氨酰胺酶的表达和谷氨酰胺分解代谢

3.5 LincRNA-p21 通过调控谷氨酰胺酶的表达影响膀胱癌细胞对谷氨酰胺代谢抑制的敏感性

4、讨论

5、结论

参考文献

附录

致谢

综述:LincRNA-p21在肿瘤细胞中功能与机制的研究进展

参考文献

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