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【6h】

长链非编码RNA MEG3调控NLRC5在类风湿关节炎中的作用与机制研究

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英文缩写词表

1 前言

2 实验材料

2.1 实验动物

2.2材料和试剂

2.3 仪器与设备

2.4 溶液和试剂配制

2.5 图象分析软件

3 实验方法

3.1 建立类风湿关节炎大鼠模型

3.2 原代成纤维样滑膜细胞的培养

3.3 原代成纤维样滑膜细胞的鉴别

3.4 组织病理学评估

3.5大鼠关节炎评分及足肿胀评分

3.6 细胞因子ELISA法检测

3.7 NLRC5免疫组织化学染色及免疫荧光检测

3.8 RNA荧光原位杂交

3.9 MEG3过表达质粒及NLRC5小干扰RNA的转染

3.10 甲基化-特异性PCR

3.11 MTT细胞增殖试验

3.12 细胞周期分析

3.13 实时定量PCR

3.14 Western blot 法检测蛋白的表达

3.15 统计分析

4 实验结果

4.1类风湿关节炎(RA)大鼠模型的建立

4.1.1 关节炎大鼠模型的形态学检测

4.1.2 关节炎大鼠模型的血清学检测

4.1.3 关节炎大鼠模型的病理学检测

4.1.4 原代滑膜细胞的鉴定

4.2 大鼠模型组与对照组中MEG3和NLRC5的表达

4.2.1 模型组大鼠与对照组大鼠中MEG3的表达

4.2.2 模型组大鼠与对照组大鼠中NLRC5的表达

4.3 RA大鼠模型组与对照组中炎症因子的表达和FLSs的增殖

4.3.1 RA模型组大鼠与对照组大鼠中炎症因子的表达

4.3.2 RA模型组大鼠与对照组大鼠中滑膜细胞的增殖情况

4.4 过表达MEG3下调NLRC5的表达,抑制炎症细胞因子的表达和FLSs的增殖

4.4.1 过表达MEG3后MEG3的表达情况

4.4.2 过表达MEG3对NLRC5表达的影响

4.4.3 过表达MEG3对炎症因子表达的影响

4.4.4 过表达MEG3对原代滑膜细胞增殖的影响

4.5 沉默NLRC5抑制炎症细胞因子的表达和FLSs的细胞增殖

4.5.1沉默NLRC5后NLRC5的表达情况

4.5.2 沉默NLRC5对炎症因子表达的影响

4.5.3 沉默NLRC5对原代滑膜细胞增殖的影响

4.6 关节炎大鼠中MEG3的低表达与DNA甲基化有关

4.6.1 关节炎大鼠中MEG3的甲基化状态

4.7 MEG3表达变化的甲基化依赖机制。

5 讨论

6 结论

参考文献

附录

致谢

综述:NLRC5在免疫疾病中的研究进展

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著录项

  • 作者

    刘亚如;

  • 作者单位

    安徽医科大学;

  • 授予单位 安徽医科大学;
  • 学科 药理学
  • 授予学位 硕士
  • 导师姓名 李俊;
  • 年度 2019
  • 页码
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 中文
  • 中图分类
  • 关键词

    长链; 非编码; RNA; 调控; 类风湿关节炎;

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