声明
英文缩写词
1 前言
2.材料与方法
2.1材料
2.1.1实验细胞
2.1.2主要试剂
2.1.3部分试剂配制
2.1.4主要仪器
2.2方法
2.2.1细胞培养
2.2.3 LPS诱导RAW264.7细胞向M1型细胞极化
2.2.4重组慢病毒质粒ROP16Ⅰ/Ⅲ稳转RAW264.7细胞向M2型细胞极化
2.2.5 Transwell共培养体系:IBD体外炎症模型的建立
2.2.6 Griess法检测细胞上清中NO的含量
2.2.7 Western blotting检测细胞极化状态
2.2.8 qRT-PCR检测细胞炎症因子的表达
2.2.9 ELISA法检测细胞炎症因子的表达
2.2.10流式细胞仪检测细胞凋亡
2.2.11统计分析
3结果
3.1重组慢病毒质粒ROP16Ⅰ/Ⅲ稳转RAW264.7细胞
3.2 LPS诱导RAW264.7细胞时间点的选择
3.3 LPS诱导RAW264.7向M1炎性细胞极化的结果
3.3.1 qRT-PCR法定量RAW264.7细胞向M1型炎性细胞极化的结果
3.3.2 ELISA法检测LPS诱导RAW264.7细胞向M1型炎性细胞极化的结果
3.3.3 Western blotting法检测M1型炎性细胞中iNOS蛋白的表达
3.3.4 Griess法检测细胞上清中NO的含量
3.4重组慢病毒质粒ROP16Ⅰ/Ⅲ诱导RAW264.7细胞向M2细胞极化的结果
3.4.2 qRT-PCR和ELISA法检测重组慢病毒质粒ROP16Ⅰ/Ⅲ转染RAW264.7细胞向M2细胞极化
3.5 Transwell共培养体系中M1型炎性细胞诱导Caco-2细胞凋亡
3.6 M1型细胞与M2细胞混合培养抑制Caco-2细胞凋亡
3.6.1 qRT-PCR和ELISA法检测M2型细胞下调M1型细胞炎症
3.6.2 流式细胞仪测M1炎性巨噬细胞和M2细胞混合培养抑制Caco-2细胞凋亡
4 讨论
5 结论
参考文献
附录
致谢
综述:弓形虫ROP16Ⅰ/Ⅲ与炎症性肠病的相关性研究进展