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【6h】

NLRC5在透明细胞肾细胞癌中的功能与机制研究

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中英文缩略词表(Abbreviation)

1 前言

2 实验材料

2.1 人癌及癌旁组织样本

2.2 细胞株

2.3 仪器与设备

2.4 药品与试剂

2.5 实验动物

3 实验方法

3.1细胞培养

细胞复苏

细胞传代

细胞冻存

3.2 细胞转染实验

质粒大提

转染

3.3 蛋白免疫印迹法(western blotting)

组织蛋白提取

细胞蛋白提取

SDS-PAGE电泳

转膜

封闭孵抗体

细胞RNA提取

组织RNA提取

实时荧光定量

3.5 流式细胞周期实验

3.6 CCK-8细胞增殖实验

3.7 细胞侵袭与迁移实验

侵袭实验

迁移实验

3.8 组织病理学

HE染色

免疫组化

3.9 裸鼠成瘤实验

构建稳定低表达NLRC5细胞株

裸鼠成瘤

3.10 TCGA数据分析

3.11 统计分析

4 实验结果

4.1 在透明细胞肾细胞癌患者组织中NLRC5表达量较正常组织高,并且NLRC5表达量与肿瘤临床分级和预后相关

4.2 NLRC5在透明细胞肾细胞癌组织中以及透明细胞肾细胞癌细胞系中表达升高

4.3 人源质粒pEGFP-C3-NLRC5或小干扰RNA瞬时转染透明细胞肾细胞癌细胞系构建瞬转高表达或低表达NLRC5细胞系

4.4 NLRC5对透明细胞肾细胞癌细胞系增殖的影响

4.5 NLRC5对透明细胞肾细胞癌细胞系侵袭和迁移的影响

4.6 NLRC5对Wnt/β-catenin信号通路的影响

4.7 体内裸鼠成瘤实验

5 讨论

6 结论

参考文献

附录

致谢

综述:NOD样受体家族在肾脏疾病中研究进展

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