南湖菱菱壳中抗胃癌活性成分的研究

摘要

南湖菱因主产浙江嘉兴南湖而得名。诸多记载表明菱壳有治疗黄水疮、皮肤疣赘、胃癌、食道癌、宫颈癌等功效，并已广泛应用于民间。本研究首先应用半仿生提取的理论，以对胃癌细胞的抑制活性为导向，建立半仿生提取菱壳中抗胃癌活性成分的方法；利用均匀设计法优化提取工艺：考察提取时间、料液比、最适胃蛋白酶用量、最适胰蛋白酶用量等单因素对提取的影响。菱壳以料液比1:10，不加入胃蛋白酶，37℃提取30min，离心收集沉淀，添加4％胰蛋白酶，37℃提取30 min，可获得最佳抑制效果，细胞存活率仅为45.52％。研究菱壳提取液成分含量结果测得总黄酮1.335±0.010 mg/mL、总多酚3.747±0.038 mg/mL、总多糖0.910±0.001 mg/mL、总皂苷0.719±0.007 mg/mL；测定提取液的抗氧化能力测得ABTS法抗氧化活性相当于4.118±0.006mg/mL Vc，FRAP法测抗氧化活性相当于2.464±0.239 mg/mL Vc，还原力法测得抗氧化活性相当于0.333±0.033mg/mL Vc。最后，考察了菱壳提取液对氧化损伤内皮细胞的修复作用，先构建氧化逆境模型，在此基础上考察其对清除细胞内脂质过氧化物积累及调节自由基清除抗氧化物酶的影响，结果显著降低了细胞内脂质过氧化物MDA积累量并显著保护了SOD酶活性。研究发明了一种新的活性成分提取方法，并通过分析活性成分及修复细胞氧化损伤情况，验证了菱壳提取物的生物活性。菱壳源天然因子具独特性质，积极探索相关的提取、分离、纯化机制以及与天然因子的功能机理研究，有助于深化菱壳天然因子在食品、医药领域的产品开发。