急性肝衰大鼠血清I-FABP、MTL及GAS水平变化及其意义

摘要

目的：观察急性肝衰竭(ALF)大鼠血清肠型脂肪酸蛋白(I-FABP)、胃动素(MTL)胃泌素(GAS)水平变化，分析其与急性肝衰竭大鼠胃肠功能障碍之间的关系，从而为急性肝衰竭胃肠功能障碍的早期预测提供理论和实验依据。
　　方法：清洁级健康雌性SD大鼠85只，随机分成ALF模型组(n=50)，正常对照组(n=35)，适应性喂养3天。ALF模型组大鼠采用TAA(生理盐水配成40g/L)进行腹腔注射，注射剂量为350mg/Kg，24h后按原剂量重复腹腔注射一次，建立大鼠ALF模型；正常对照组同时间点腹腔注射同等量生理盐水。分别于腹腔注射完成后24h、36h、48h取血测定各组大鼠肝功能指标，包括ALT、AST、TBiL，应用酶联免疫法测定各组大鼠血清I-FABP、MTL、GAS水平。同时取血完成后处死大鼠取右叶肝组织、胃窦及2cm近端十二指肠。经40g/L甲醛缓冲液固定后，石蜡包埋、切片、HE染色，光镜下观察肝及小肠组织病理变化。用SPSS16.0统计软件对实验数据进行统计学处理，计量资料统计学描述采用-x±s，组间指标差别检验采用单因素方差分析，相关性分析采用Pearson相关分析，统计学性确定为双侧检验，以P<0.05为差异有显著性。
　　结果：
　　1.两组大鼠临床观察：
　　正常对照组：自腹腔注射生理盐水至实验结束大鼠活动自如，反应灵敏，自由饮食，大小便正常，全部存活。
　　ALF模型组：自造模完成后大鼠逐渐出现进食减少，拒食，精神萎靡、嗜睡、昏迷，反应迟钝，自主活动减少，腹部膨隆，可见明显胃肠型等肝性脑病及胃肠障碍的表现。
　　2.ALF模型组与正常对照组肝功能比较
　　与正常对照组比较，ALF模型组大鼠24h、36h、48h各时间点ALT、AST、TBIL均明显升高[ALT(U/L)24h：346.81±127.04/50.15±11.94，36h：182.07±72.52/50.24±11.51，48h：98.36±31.84/49.82±9.78；AST(U/L)24h：1311.25±552.20/161.26±36.49，36h：744.64±290.00/164.33±39.91，48h：440.66±123.93/165.20±42.81；TBIL(mmol/L)24h：6.54±2.32/3.79±1.15，36h：8.45/3.38/3.75±1.12，48h：13.20±4.45/3.76±1.22]，差异有统计学意义(均P<0.01)，且ALF模型组大鼠血清ALT、AST水平随时间呈逐渐降低趋势，TBIL水平随时间呈逐渐升高趋势，出现“胆酶分离”。
　　3.ALF模型组大鼠与正常对照组大鼠血清I-FABP、MTL、GAS比较
　　与正常对照组比较，ALF模型组大鼠血清I-FABP(ng/L)水平各时间点均明显升高(24h：14.41±5.07/10.48+2.29，36h：18.60±5.57/10.46±4.14，48h：22.63±6.86/9.60±3.67)，差异有统计学意义(P<0.05)；且ALF模型组大鼠48h时血清I-FABP水平较24h明显升高(P<0.01)；各时间点ALF模型组大鼠MTL(ng/L)水平较正常对照组大鼠明显下降(24h：135.50±30.15/265.10±44.35，36h：125.84±42.00/253.19±49.18，48h：144.19±40.74/262.70±58.48)，差异有统计学意义(P<0.05)；各时间点ALF模型组大鼠GAS(ng/L)水平较正常对照组大鼠明显升高(24h：2.15±0.88/1.45±0.48，36h：2.37±0.89/1.52±0.48，48h：3.45±1.57/1.58±0.83)，差异有统计学意义(P<0.05)；且ALF模型组大鼠48h时血清GAS水平较24h明显升高(P<0.01)。
　　4.两组大鼠肝脏组织及胃、十二指肠组织病理变化
　　正常对照组大鼠肝脏和胃及十二指肠组织光镜观察均未见异常。
　　ALF模型组大鼠肝组织结构不清，肝小叶结构紊乱，可见肝细胞高度水肿，气球样变，汇管区炎细胞浸润，以中央静脉为中心的肝细胞坏死(灶状坏死及大片坏死)明显；胃及十二指肠肠壁可见黏膜上皮细胞坏死脱落，绒毛坏死脱落。
　　结论：
　　1.本实验两次间隔24h腹腔注射TAA(生理盐水配成40g/L)350mg/Kg成功制备出急性肝衰竭并发胃肠功能障碍大鼠模型。
　　2.急性肝衰竭大鼠血清I-FABP水平显著升高，与相关报道一致，提示I-FABP可作为急性肝衰竭胃肠黏膜缺血及胃肠功能障碍的监测指标。
　　3.血清MLT水平显著降低，与多数报道并非一致；血清GAS水平显著升高，与相关报道一致，提示MLT、GAS在急性肝衰大鼠出现胃肠功能障碍的机制中起一定作用，其水平变化可作为胃肠障碍的指标之一。