溶血磷脂酸在卵巢癌发生机制中作用的初步探讨

摘要

目的
　　 研究血浆溶血磷脂酸(LPA)对卵巢癌细胞增殖的影响，选用促分裂素原活化蛋白激酶(MAPK)信号传导通路特异性阻滞剂PD98059，阻断MAPK信号传导通路后，观察溶血磷脂酸对卵巢癌细胞作用的变化，从而初步探讨溶血磷脂酸促卵巢癌细胞增殖的作用机制。
　　 方法
　　 体外培养人卵巢上皮癌细胞株SKOV3细胞，选用MAPK信号传导通路特异性阻断剂PD98059，将细胞随机分为四组:正常对照组(NC组:不加任何药物)、溶血磷脂酸组（LPA组:加入不同浓度的溶血磷脂酸）、PD98059组（PD98059组:加入10μmol/L的PD98059）和溶血磷脂酸+PD98059组（LPA+PD98059组:加入不同浓度的溶血磷脂酸和10μmol/L的PD98059）。应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定溶血磷脂酸对SKOV3细胞增殖活性的影响，联合应用PD98059阻断MAPK信号传导通路时，测定SKOV3细胞增殖活性的变化;应用实时荧光定量RT-PCR测定溶血磷脂酸单独或合用PD98059对SKOV3细胞表达环氧化酶-2(COX-2)的影响;应用流式细胞仪(FCM)测定细胞的凋亡及细胞增殖周期动力学的变化。
　　 结果
　　 溶血磷脂酸(浓度＞10μmol/L)以剂量依赖方式促进SKOV3细胞增殖，PD98059显著抑制溶血磷脂酸促增殖作用(P＜0.05)。RT-PCR结果显示，溶血磷脂酸能促进环氧化酶-2的表达(P＜0.05)，随着溶血磷脂酸浓度的增高，SKOV3细胞环氧化酶-2基因表达增多(P＜0.05)，而合用PD98059后环氧化酶-2的表达降低(P＜0.05)。FCM结果显示，溶血磷脂酸能促进细胞增殖，抑制细胞凋亡，增加S期比率，而合用PD98059后溶血磷脂酸促增殖作用消失，且G0/G1期细胞比率升高，S期细胞比率降低。
　　 结论
　　 血浆溶血磷脂酸以浓度依赖的方式促进卵巢癌SKOV3细胞的增殖，抑制SKOV3细胞凋亡，应用MAPK信号传导通路特异性阻断剂PD98059后，溶血磷脂酸的促增殖作用消失，并且抑制了溶血磷脂酸促环氧化酶-2基因表达的作用。由此推断溶血磷脂酸是通过MAPK信号传导通路促进卵巢癌细胞增殖，且与环氧化酶-2基因表达有关。

目录

声明

第一部分：溶血磷脂酸促卵巢癌细胞增殖机制的研究

摘要

英文缩略词

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

附图

参考文献

第二部分：溶血磷脂酸抑制顺铂诱导卵巢癌细胞凋亡机制的研究

摘要

英文缩略词

前言

材料与方法

结果

讨论

结论

附图

参考文献

致谢

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