青蒿素含氟衍生物的设计合成及其抗肿瘤活性与作用机制研究

摘要

近几十年来，癌症的发病率持续上升，特别是乳腺癌、肺癌、黑色素瘤等，严重的威胁着人们的健康。目前，临床上用于治疗癌症的方法主要有传统医学、外科手术、放射治疗和化学疗法等，但这些方法并不是特别有效。传统的治疗方法在杀死肿瘤细胞的同时也会对正常细胞造成损伤，随之而来的是脱发、肝脏毒性等一系列副作用。因此，当务之急是去寻求一种高效低毒的新型抗肿瘤药物。
　　一直以来，青蒿素及其衍生物因其高效的抗疟疾活性被广泛用于临床，大量研究表明，青蒿素在抗肿瘤、抗血吸虫、抗孕、抗心律失常等方面具有良好的作用。由于氟原子具有半径小、电负性强等特点，向化学分子中引入氟原子，可改善其化学和生物学性质，包括稳定性、亲脂性和生物利用度等。因此，以青蒿素为先导化合物，设计并合成一系列含氟的青蒿素衍生物，以期得到具有较好的抗肿瘤活性的化合物，并对其作用机制进行初步的研究。
　　在此背景下，合成了34个青蒿素衍生物，包括6个青蒿素酯类衍生物，12个青蒿素醚类衍生物和16个青蒿素胺类衍生物。通过MTT实验，考察青蒿素衍生物对U87MG，SH-SY5Y，MCF-7，MDA-MB-231，A549和A375等肿瘤细胞的细胞毒作用。实验结果表明，相比于青蒿素而言，其衍生物的抗肿瘤活性有一定的增强，其中化合物11p在乳腺癌细胞MCF-7上表现出最明显的细胞毒性，并且化合物11p在人正常肝细胞的的毒性比阿霉素要弱，故对化合物11p的作用机制做了进一步的研究。利用流式细胞仪和AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测得知，经化合物11p处理后，细胞的凋亡率随浓度呈增长趋势。利用Hoechst33258对细胞核进行染色，发现经化合物11p处理的细胞发生细胞形态的改变，包括细胞内染色质浓缩和凋亡小体的形成。利用流式细胞仪对细胞周期分布进行检测，发现化合物11p可阻滞细胞在G1期，进而抑制细胞增殖发挥细胞毒性作用。综合以上研究可知，化合物11p在乳腺癌细胞上表现出优良的抗肿瘤活性，有进一步深入开发研究的价值。

目录

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摘要

缩写对照表(LIST OF ABBREVIATIONS)

第一章 绪论

1．1 青蒿素的发现

1．2 青蒿素衍生物的研究进展

1．3 青蒿素类药物的药理活性

1．3．1 抗疟疾作用

1．3．2 抗肿瘤作用

1．3．3 抗寄生虫作用

1．3．4 抗孕作用

1．3．5 抗纤维化作用

1．3．6 其他作用

第二章 课题立题依据和研究内容

2．1 课题立题依据

2．2 课题主要研究内容

3．1 实验仪器

3．2 实验试剂

3．3 试剂的预处理

3．4 试验方法

3．4．1 二氢青蒿素DHA的合成

3．4．2 青蒿素酯类衍生物3a~3f的合成

3．4．3 青蒿素醚类衍生物4a~41的合成

3．4．4 青蒿素胺类衍生物11a~11p的合成

第四章 生物活性实验部分

4．1 实验材料

4．1．1 细胞株

4．1．2 药物

4．1．3 实验仪器

4．1．4 实验试剂

4．2 实验方法

4．2．1 MTT法筛选活性药物

4．2．2 Hoechst 33258染色检测细胞凋亡

4．2．3 Annexin V-FITC和PI染色检测细胞凋亡

4．2．4 细胞周期检测

4．3 实验结果与讨论

4．3．1 MTT实验结果

4．3．2 Hoechst 33258染色检测11p对MCF-7细胞凋亡的影响

4．3．4 化合物11P对MCF-7细胞生长周期的影响

第五章 结论

附录

参考文献

致谢

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