18β-甘草次酸和齐墩果酸衍生物的设计、合成及抗癌活性研究

摘要

癌症已经成为一种导致人类死亡的主要原因。因此，近几十年来医药领域的研究人员一直在积极研究癌症，努力研发具有高抗癌活性的药物。研究发现，通过对自身具有抗癌活性的天然产物进行结构改造、修饰很容易获得低毒、高效的抗癌药物。
　　18β-甘草次酸(18β-Glycyrrhetinic acid，18β-GA)和齐墩果酸(oleanolic acid，OA)是分别从天然产物甘草和女贞中提取分离出来的天然产物。研究发现，18β-GA和OA具有相似的结构，都是五环三萜类化合物，都具有一定的抗病毒、抗炎和抗肿瘤等生物活性，再者中国有着丰富的甘草和女贞资源，所以18β-GA和OA在临床上已经被广泛应用，药用前景非常广阔。
　　为了得到具有高抗癌活性的18β-GA和OA衍生物，本文以具有一定抗癌活性的18β-GA和OA为先导化合物，采用拼接原理，对18β-GA和OA的羧基和羟基位置进行了结构修饰，并对得到的衍生物进行了抗癌活性测试。
　　本论文的研究主要包含以下三部分内容:
　　第一部分是对18β-GA和OA的药理活性、研究进展和发展前景进行介绍;
　　第二部分设计并合成了一系列18β-GA和OA衍生物，即先将18β-GA和OA反应生成乙酯或苄基酯，然后再在C-3羟基位置引入有机酸基团，总共设计并合成了30个化合物，其中28个化合物是没有被文献报道的化合物，并运用高分辨质谱和核磁共振对这28个新型化合物进行表征;
　　第三部分是运用MTT法对18β-GA和OA及其衍生物进行抗癌活性研究，分别测试了18β-GA和OA乙酯类衍生物对乳腺癌MCF-7细胞，肝癌HepG2细胞和人正常肝LO2细胞的抑制活性，18β-GA和OA苄基酯类衍生物对胃癌SGC-7901细胞，食管癌Eca-109细胞，乳腺癌MCF-7细胞，宫颈癌HeLa细胞，肝癌HepG2细胞和人正常皮肤成纤维HSF细胞的抑制活性。结果表明，化合物5o，5p和7b表现出比市售抗癌药物吉非替尼更高的抗癌活性。另外，通过Hoechst33342染色法，Annexin V-PE/7-AAD双染法和MDC荧光染色研究发现化合物7b能够诱导HepG2细胞凋亡和自噬。

目录

声明

摘要

符号说明

第一章 前言

1．1．2 齐墩果酸简介

1．2 18β-甘草次酸和齐墩果酸的药理活性

1．2．2 18β-甘草次酸和齐墩果酸的抗炎作用

1．2．3 18β-甘草次酸和齐墩果酸的抗病毒作用

1．2．4 18β-甘草次酸和齐墩果酸的抗菌作用

1．2．5 18β-甘草次酸和齐墩果酸的保肝作用

1．2．6 18β-甘草次酸和齐墩果酸的抗氧化作用

1．3 18β-甘草次酸和齐墩果酸衍生物的研究进展

1．4 18β-甘草次酸和齐墩果酸的发展前景

第二章 18β-甘草次酸和齐墩果酸乙酯及苄基酯类衍生物的合成及表征

2．1 课题研究主要内容

2．2 18β-甘草次酸和齐墩果酸衍生物的设计思路与创新点

2．3 实验仪器及试剂

2．3．1 实验仪器

2．3．2 实验试剂

2．4 18β-甘草次酸和齐墩果酸乙酯及苄基酯类衍生物的合成

2．4．1 18β-甘草次酸和齐墩果酸衍生物2a-b和4a-b的合成

2．4．2 18β-甘草次酸和齐墩果酸乙酯类衍生物3a—j的合成以及表征

2．4．3 18β-甘草次酸和齐墩果酸苄基酯类衍生物5a．e，5h．n，5q．r和7a．b的合成以及表征

2．4．4 18β-甘草次酸和齐墩果酸苄基酯类衍生物5f-g和50-P的合成以及表征

2．4．5 化合物4a或4b与吡啶／乙酸酐反应制备化合物7a或7b

第三章 18β-甘草次酸和齐墩果酸乙酯及苄基酯类衍生物的体外抗肿瘤活性研究

3．1 细胞培养试剂及器材

3．2 检测试剂及设备

3．3 肿瘤细胞的培养

3．4 肿瘤细胞生长抑制试验

3．5 用Hoechst 33342染色方法进行细胞凋亡测定

3．6 由化合物7b引发的细胞凋亡

3．7 由化合物7b引起的自噬

3．8 结果与讨论

3．8．2 18β-甘草次酸和齐墩果酸苄基酯类衍生物体外细胞毒活性测试结果与讨论

3．8．3 化合物7b对HepG2细胞的体外抗增殖活性结果与讨论

3．8．4 化合物7b对HepG2细胞凋亡的影响

3．8．5 化合物7b对HepG2细胞自噬的影响

3．9 结论与展望

3．9．1 结论

3．9．2 展望

附录

参考文献

致谢

攻读硕士学位期间发表(和待发表)的学术论文目录

附件