引言
材料与方法
1 实验材料
1.1 主要试剂和材料
1.2 RT-PCR引物
1.3 质粒信息
2 实验仪器
3 实验动物
4 实验方法
4.1 溶液配制
4.2 质粒转化与提取
4.3 细胞培养与质粒转染
4.4 小鼠原代皮肤细胞分离与培养
4.5 FlexStation 3胞内钙流检测
4.6 全细胞膜片钳记录
4.7 细胞死亡测定
4.8 小鼠瘙痒行为观察及连翘酯苷B药理学评价
4.9 Western blotting
4.10 RNA提取
4.11 逆转录和荧光定量 PCR
4.12 分子对接
5 统计学处理
实验结果
1.连翘酯苷B抑制TRPV3通道活性的评价
1.1利用Flexstation 3方法评价连翘酯苷B对TRPV3通道活性的抑制作用
1.2连翘酯苷B抑制TRPV3通道活性的电生理评价
2.连翘酯苷B选择性地抑制TRPV3通道的电流
3.连翘酯苷B在不同皮肤瘙痒模型中的药理学评价
3.1 连翘酯苷B抑制AEW诱导的干皮病小鼠模型的瘙痒行为
3.2连翘酯苷B抑制组胺引发的急性瘙痒
3.3连翘酯苷B抑制TRPV3激动剂香芹酚引发的急性瘙痒
4. 连翘酯苷B抑制过度激活的TRPV3引发的细胞死亡
4.1.1连翘酯苷B剂量依赖地抑制TRPV3功能获得性点突变导致的细胞死亡
4.1.2 CaMKII在TRPV3 G573S点突变诱导的细胞死亡中发挥重要作用
4.2连翘酯苷B剂量依赖地抑制香芹酚导致的细胞死亡
5. 连翘酯苷B可能结合到选择性滤器和中央空腔之间抑制TRPV3的活性
讨论
结论
参考文献
综述:TRPV3通道及其在皮肤中的功能研究
综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
缩略词表
致谢
声明
