HERG F68C突变导致LQT2综合征的发病机制研究

目录

声明

1 前言

1.1 长QT综合征概述

1.2 HERG突变导致长QT综合征研究概述

1.2.1 HERG通道基因和编码蛋白

1.2.2 HERG通道蛋白的合成，加工和转运

1.2.3 HERG基因突变导致LQT2的分子机制

1.3 HERG突变的临床治疗和挽救

2 实验材料和方法

2.1 主要试剂

2.2抗体信息

2.3 实验仪器

2.4 常用溶液配制方法

2.5 实验方法

2.5.1 质粒的构建

2.5.2 细胞培养及转染

2.5.3 全细胞膜片钳

2.5.5 CCK-8细胞增殖检测

2.5.6 细胞凋亡与坏死检测

2.5.7Western blot步骤

2.5.8 考马斯亮蓝染色

2.5.9 核质分离步骤

2.5.10 TritonX-100 溶解实验步骤

2.5.11 限制性蛋白酶 （limited proteolysis）酶解

3 结果

3.1 HERGF68C突变的鉴定

3.2 HERG F68C突变蛋白表达减少，影响蛋白转运上膜

3.3 HERG F68C突变蛋白稳定性降低

3.4 HERG F68C突变结构发生改变

3.5 HERG F68C突变呈现负显性效应

3.6 HERG F68C突变导致电流减小

3.7 HERG F68C突变不导致HERG蛋白聚集，不发生内质网应激

3.8 HERGF68C突变无法进行常规低温及药物挽救

3.9 RNAi挽救HERG-F68C突变体功能

3.10 siRNA处理不影响细胞正常生理

4 讨论

致谢

参考文献