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四川地区粘蛋白Mur血型抗原的妊娠免疫风险研究以及眉山地区汉族人群Landsteiner-Wiener血型基因的多态性分析

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1 前言

第一部分 四川地区粘蛋白Mur血型抗原的妊娠免疫风险研究

1 材料与方法

1.1 样本及其来源

1.2 主要仪器耗材及其型号

1.3 主要试剂及其批号

1.4 实验方法

2 结果

2.1 样本DNA浓度及纯度测试结果

2.2 样本DNA扩增产物电泳结果

2.3 测序及比对基因型结果

2.4 母亲血浆抗体筛查结果

3 讨论

4 结论

第二部分 四川眉山地区汉族人群LW血型基因的多态性分析

1 材料与方法

1.1 研究材料

1.2 方法

2 结果

3 讨论

4 结论

参考文献

附录

致谢

综述: 红细胞不规则抗体的减缓策略

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摘要

目的:
  回顾性调查GP.Mur血型阴性的母亲生育阳性胎儿,探讨妊娠免疫产生抗-Mur抗体的意义与阳性率;同时评价LW血型基因在眉山地区汉族人群中的基因多态性及其基因是否存在突变。
  方法:
  收集合作单位四川省脐带血库的胎儿脐带血样本与其母亲的外周静脉血样本,通过基因组DNA提取试剂盒抽提样本的DNA,分别对胎儿与母亲的DNA用PCR-SSP进行基因分型初筛,用基因测序的方法确定其基因型,筛选出 GP.Mur阴性的母亲与 GP.Mur阳性的胎儿,用达亚美微柱凝胶卡法对符合条件的母亲血浆进行Mur抗体鉴定,并计算产生抗体的阳性率;抽提眉山地区200名无血缘关系的无偿献血者核酸DNA,通过PCR基因扩增和完整ICAM4基因测序(包含3个外显子,2个内含子),与标准序列进行比对,确定其基因型,并且探索是否存在突变。
  结果:
  共收集5000份胎儿脐带血样本,鉴定出162份GP.Mur阳性的胎儿,其中有110份 GP.Mur阴性的母亲,Mur血型抗原在四川地区汉族人群中频率为3.24%(162/5000);用达亚美微柱凝胶卡法对符合条件的母亲血浆进行Mur抗体鉴定,全部为阴性。
  200名无偿献血者的测序结果表明,LW血型基因型皆是LWa/LWa,并没有发现LWb等位基因,全ICAM4基因序列没有发现突变。
  结论:
  本研究表明,通过妊娠免疫刺激Mur血型产生抗体的几率较小,但是由于中国人口基数大,还是要予以重视。四川眉山地区无偿献血者LW血型系统在汉族人群中主要是以LWa为主,LWb为罕见的等位基因,其血型系统在眉山地区在输血中可以认为没有太大的临床意义。

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