声明
引言
材 料 和 方 法
1.材料
1.1 试剂和耗材
1.2 常用抗体
1.3 仪器
1.4 细胞
1.5 动物
2.实验方法
2.1 细胞培养
2.2设计合成shRNA干扰靶点
2.3 慢病毒的感染
2.4 实时荧光定量PCR
2.5 Western Blot
2.6 嘌呤霉素最佳浓度的筛选
2.7 细胞MTT实验
2.8 细胞集落克隆
2.9 EdU细胞增殖检测实验
2.10 流式检测细胞周期
2.11流式检测细胞凋亡
2.12 细胞成球实验
2.13 流式测细胞表面抗体
2.14 小鼠皮下成瘤实验
2.15 CCK-8实验
2.16 统计学分析
结果
一、BAF170在正常乳腺细胞和乳腺癌细胞中的表达情况
1.Western Blot检测慢病毒对乳腺癌细胞中BAF170蛋白表达的敲低效率
2. BAF170对乳腺癌细胞增殖的调控作用
3.BAF170对乳腺癌细胞系细胞周期的调控作用
4.BAF170对乳腺癌细胞凋亡的调控作用
三、乳腺癌细胞系中BAF170对肿瘤干细胞的调控作用
四、BAF170敲低后对乳腺癌细胞在体内增殖的调控作用
五、BAF170在乳腺癌中参与PI3K信号通路的调控
六、抑制PI3K对乳腺癌细胞表型的影响
1. 抑制PI3K对乳腺癌细胞系增殖的调控作用
2. 抑制PI3K对乳腺癌细胞周期的调控作用
3. 抑制PI3K促进乳腺癌细胞凋亡
讨论
结论
参考文献
致谢
附录A
附录B
附录C
附录D 综述:SWI/SNF染色质重塑复合物成员BRG1在肿瘤中的功能
