乙肝病毒的异质性与乙肝疫苗阻断母婴传播的关系

摘要

目的：探讨乙型肝炎病毒(HBV)的复制水平、基因型及其S、P区变异对乙型肝炎(乙肝)疫苗阻断母婴传播效果的影响。 方法：采集37对乙肝疫苗免疫失败的母婴配对血清74份，以及41对阻断成功的母亲血清41份，以酶联免疫吸附法(ELISA)和微粒免疫技术(MEIA)作乙肝三系检测，以特异性引物聚合酶链反应(PCR)或套式PCR(nest-PCR)扩增HBVP、S区基因，进而通过DNASTAR软件，分析免疫失败母婴HBV基因型以及HBV S、P区基因的变异性，并以实时荧光定量PCR检测所有免疫失败母婴及免疫成功母亲血清HBV载量。 结果： (1)HBV S区PCR产物电泳阳性率：37例阻断失败母亲为83.78％(31／37)；37例阻断失败儿童为43.24％(16／37)；41例阻断成功母亲为60.98％(25／41)。 (2)平均HBV DNA．载量：阻断失败母亲、阻断失败儿童、阻断成功母亲分别是4.17×107、6.65×107、8.40x106，在阻断成功母亲组与阻断失败母亲组之间存在明显差异，而在阻断失败母婴之间不存在统计学差异，也不存在线性关系。 (3)母婴配对HBV S基因同源性：阻断失败母婴配对的HBV S基因同源性在99.5％以上。 (4)HBV基因型组成：阻断成功母亲与阻断失败母亲均以C基因型为主，其检出率阻断失败母亲组高于阻断成功母亲组，但无统计学意义。 (5)HBV“a”决定簇存在多个变异位点：在阻断失败儿童中检出G145R、G145A变异，在阻断失败母亲中检出T123A、G145R变异，在阻断成功母亲中则检出T126N、T126S、T143N、D144A、D144G变异。 (6)HBV P基因变异性：检测23例阻断失败母亲及9例阻断成功母亲的HBV P基因区序列，没有发现变异位点。 结论： (1)HBV DNA的高拷贝是乙肝疫苗阻断母婴垂直传播失败的高危因素。 (2)配对母婴之间的HBV病毒株S基因高度同源，提示儿童感染HBV来自垂直传播。 (3)感染的HBV基因型与乙肝疫苗免疫阻断成功与否无明显相关。 (4)HBV“a”决定簇存在多个位点的变异，其中G145R、G145A变异存在于阻断失败儿童，T123A、G145R变异存在于阻断失败母亲，是否与乙肝疫苗免疫失败相关有待进一步研究；T126N、T126S、T143N、D144A、D144G变异存在于阻断成功母亲，不影响目前乙肝疫苗的免疫效果。 (5)HBV P基因变异与乙肝疫苗免疫阻断成功与否无明显相关。

目录

前言

材料和方法

(一)标本来源

(二)实验试剂

(三)主要实验仪器

(四)实验方法

结果

讨论

结论

参考文献

附图

综述 全身炎症反应综合征的分子发病机制及其治疗研究

致谢