HSP70在急性脊髓损伤后的表达及GGA修复急性脊髓损伤的实验研究

摘要

目的：探讨急性脊髓损伤后热休克蛋白70（heat shock prtein70，HSP70）表达的变化规律；通过诱导急性脊髓损伤后早期HSP70的大量表达，探讨其诱导剂替普瑞酮（Geranylgeranylacetone，GGA）修复脊髓损伤的疗效，综合、客观评价脊髓功能恢复程度，从而寻求一种简单有效、可应用于临床的新方法，为临床治疗脊髓损伤提供实验学依据。 方法： 1、急性脊髓损伤后HSP70表达的变化。健康成年雌性Wistar大鼠50只，随机分为Ⅰ假手术组：单纯显露T10节段脊髓，不予打击损伤；Ⅱ损伤组：显露T10节段脊髓，使用MASCIS Impactor ModelⅡ脊髓损伤打击器打击脊髓（10g×25mm），建立急性脊髓损伤模型。分别于术后6、12、24、48、72小时，每组随机选取5只动物，取材、固定、切片，行HSP70免疫组织化学染色，观察HSP70表达变化情况。 2、GGA对急性脊髓损伤后HSP70表达、神经细胞凋亡及神经功能恢复的影响。健康成年雌性Wistar大鼠75只，随机分为3组，各25只。Ⅰ对照组：损伤前24小时、损伤后半小时以及损伤后的每24小时至伤后1周分别经胃管给予等量生理盐水；Ⅱ损伤后给药组：损伤前24小时经胃管给予等量生理盐水，损伤后半小时以及损伤后的每24小时至伤后1周均经胃管给予GGA（溶于生理盐水）600mg/kg；Ⅲ损伤前、后联合给药组：各时间点分别经胃管给予GGA（溶于生理盐水）600mg/kg。所有动物均手术显露T10节段脊髓，使用MASCIS Impactor ModelⅡ脊髓损伤打击器打击脊髓（10g×25mm），建立急性脊髓损伤模型。免疫组织化学染色测定HSP70的表达情况，TUNEL法检测神经细胞凋亡情况，HE染色光学显微镜观察脊髓组织形态学改变，BBB评分法进行行为学功能评价。 结果： 1、急性脊髓损伤后HSP70表达水平迅速上升，至伤后24h达到高峰，之后转为下降，至伤后72h脊髓组织内已少见HSP70阳性细胞；而假手术组仅有低水平、短时间的HSP70表达。 2、各组术后12、24、48、72小时HSP70表达水平差异有统计学意义（ANOVA，P<0．05），Ⅲ组、Ⅱ组均大于Ⅰ组。各组术后12、24、48、72小时损伤部位细胞凋亡水平差异有统计学意义（ANOVA，P<0．05），Ⅲ组、Ⅱ组均小于Ⅰ组。所有大鼠在脊髓损伤后出现双下肢截瘫，BBB评分组间比较，损伤后7天至伤后28天，各组间差异有统计学意义（ANOVA，P<0．05），Ⅲ组、Ⅱ组评分大于Ⅰ组。 结论：急性脊髓损伤后HSP70表达自发性上调，但其上调的水平有限，持续时间较短。GGA可以增加急性脊髓损伤后HSP70的表达水平，减少急性脊髓损伤后神经细胞的凋亡，促进急性脊髓损伤后神经功能的恢复。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：符号说明

声明

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

一、HSP70在急性脊髓损伤后不同时间的表达

1.1材料和方法

1.2结果

1.3讨论

1.4小结

二、GGA修复急性脊髓损伤的实验研究

2.1材料和方法

2.2结果

2.3讨论

2.4小结

结论

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

附录

综述 热休克蛋白与脊髓损伤的相关研究

致谢